高营养组分小球藻选育、代谢调控及废水资源化利用

来源 :江南大学 | 被引量 : 6次 | 上传用户:sz_yaoli
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
小球藻属绿藻门小球藻属单细胞球形微藻,营自养和异养,分布广,富含蛋白、油脂及色素等营养物质。小球藻种属差异大,导致其生长特性迥异,适应外界环境条件能力也各异,培养条件影响生长及细胞组分。开发可利用有机废水培养高营养组分小球藻,促进绿色制造和循环经济,具有积极意义。本文以此为切入点,选育利用柠檬酸废水(CAE)和城市富含N/P废水(ME)高蛋白组分小球藻,研究其生理特性及优化培养基和控制条件,并调控细胞代谢途径实现蛋白质及(或)油脂等大量积累,以期高效处理CAE及ME,同时吸收大量CO2生产高营养组分藻体。主要结果如下:建立快速检测藻蛋白方法以选育高蛋白组分藻种,优化高蛋白藻体培养工艺。利用所建立的APPD-UV法快速检测藻蛋白,选出生物量、生长速率及蛋白含量均较理想的驯化藻株C. vulgaris C9-JN2010,其生物量和比生长速率均比出发株提高了13.0%,藻蛋白含量高达54.6%,必需氨基酸组成为40.8%,氮磷利用率分别高于出发株16.6%及15.3%。并比较自养、混养及异养小球藻蛋白及氨基酸合成效率,混养时生长及蛋白质产率更佳,其比生长速率和蛋白产率分别为0.526d-1和0.097g·L-1·d-1。与纯自养模式相比,Cys、Tyr和Met含量差异显著。采用P-B、最陡爬坡及CCD试验优化后的混养培养基,藻生物量及蛋白质含量分别为1.786g·L-1和47.0%,其蛋白产率为0.210g·L-1·d-1,提高了116.2%。7.5L光反应器培养,藻的比生长速率、生物量及蛋白产率分别提高到0.630d-1、0.470和0.220g·L-1·d-1。基于氮代谢调控,辅以盐胁迫和高光照强化C. vulgaris C9-2010油脂合成流向。采用单因子、P-B、最陡爬坡及CCD响应面试验优化并确定了C. vulgaris C9-2010高效自养培养基及培养条件(接种量0.150g·L-1,pH7.0,25℃,4000lux和16h:8h)。在优化的培养条件下,藻生物量及产率分别为0.755g·L-1和0.126g·L-1·d-1,提高了6.5%和6.8%。最优条件下二步培养更易积累油脂及提高产率,低氮、2.5%NaCl胁迫和高光照强度(6000lux)组合调控油脂积累效果最佳,藻油脂含量和产率分别高达26.0%和24.2mg·L-1·d-1,为对照的2.5倍和1.75倍。7.5L光反应器与摇瓶培养结果相比,前者油脂含量及产率分别高达25.6%和27.5mg·L-1·d-1,且油脂产率提高约13.6%。研究了NaCl胁迫对C. vulgaris C9-2010生理代谢及叶绿素基因转录的影响。无NaCl时C. vulgaris C9-JN2010生长速率最佳为0.225d-1,且叶绿素和蛋白含量分别高达39.5mg·g-1和55.0%。2.5%NaCl胁迫下,藻油脂含量及产率为15.5%和16.10mg·L-1·d-1,是最低值的3.6倍。适度NaCl浓度可提高藻细胞游离Pro、MDA和GSH等抗氧化物含量和抗氧化酶活,2.5%NaCl胁迫藻的脯氨酸含量高达2.3%,为无盐的20.0倍,未见更高报道;5.5%NaCl胁迫后MDA和GSH含量分别高达70.0及9.4mg·g-1DW,分别为无NaCl的2.1和2.4倍;NaCl胁迫小球藻SOD、CAT及POD酶活均显著提高,分别高达2367.5、50.3和710.4U·g-1DW,是未胁迫的3.0、4.7及2.7倍。利用荧光定量PCR方法,首次分析了无盐和3.5%NaCl胁迫藻细胞叶绿素基因chl B、chl I、chl L及chl N转录水平,3.5%NaCl胁迫藻叶绿素基因转录水平分别为无盐的2.1、1.5、4.5及4.8倍。适当NaCl浓度能增强藻细胞叶绿素基因转录,并促进大量抗氧化活性物质及酶系合成,以抵抗胁迫产生的氧化毒害。驯养小球藻高效利用有机废水磷氮,积累蛋白质与油脂。摇瓶与光反应器中分别培养C. vulgaris C9-JN2010处理CAE和ME。首先,确定了培养该藻最适CAE浓度为20.0%,于5L光反应器获得生物量和产率分别为1.040g·L-1和0.260g·L-1·d-1,且CODCr,BOD5和TOC,氮和磷去除率均高于90.0%。其次,根据摇瓶中ME培养藻的较好结果,于7.5L光反应器分批、半连续和连续培养藻,其最低比生长速率和产率约为0.200d-1和0.106g·L-1·d-1,且NH4+-N、TN、TP、CODCr及BOD5最低去除率分别为98.3%、95.5%、90.6%、88.3%和87.4%。最后,7.5L光反应器中最佳CAE/ME混合废水(20:80)培养藻可获生物量及产率分别高达1.187g·L-1和0.237g·L-1·d-1,且废水污染因子大量被去除(>90.0%)。反应器中藻生长和处理效果均高于摇瓶,且稍高于单独处理CAE和ME,污染因子残留较低接近城镇污水厂废水排放标准(总氮≤15.0mg·L-1,总磷≤0.5mg·L-1,氨氮≤5.0mg·L-1,CODCr≤120.0mg·L-1和BOD5≤60.0mg·L-1)。并发现藻生物量总蛋白、总油脂、粗纤维、灰分和总磷含量分别为48.0%-55.0%,10.0%-30.0%,3.3%-4.0%,5.0%-5.5%和0.65%-0.80%,且必需氨基酸与多不饱和脂肪酸组成比例分别高达44.5%和73.4%。以上结果表明,利用发酵废水培养C. vulgaris C9-JN2010使废水得以资源化具有较好的前景,由于藻细胞富含必需氨基酸和不饱和脂肪酸,是一种很有潜力的优良饲料蛋白来源。
其他文献
直流力矩电机驱动装置是以电气控制信号控制电机运动,将电压信号转换成对应的位置输出信号,去除控制下一级的液压随动装置,克服了民液伺服阀控制对油质的要求。该装置的简洁、功
当今世界经济全球化深入发展,国际竞争日趋激烈,知识越来越成为提高综合国力和国际竞争力的决定性因素,人才资源也越来越成为推动经济社会发展的战略性资源。中国的未来发展
在当前的图书营销生态中,尤其是童书出版领域,社群营销已然成为除平台电商争霸和实体书店转型升级之外的第三股强劲力量。文章从实现内容价值和扩大品牌效应、提高社群营销的
美国行为语义学家莫里斯明确提出了符号学三大分野:语义学(semantics),语构学(syntac-tics)和语用学(pragmatics),还进一步把语言符号的意义分为三大类:所指意义;言内意义;语
食品安全影响着每个人的日常生活和健康,随着近年来重大食品安全问题不断被爆出,食品安全成为了人们关注的焦点,食品安全抽检监测工作越来越受到重视。本文从当前食品安全的
用激光共聚焦显微镜观察并定量测定了喷墨打印中水性颜料墨水在6种纸样中的渗透情况,检测了打印图像的质量,建立了墨水渗透与打印质量的定量关系。结果表明,墨水渗透主要受纸
浙江省乐清市供水系统是以乐清市淡溪水库为水源向乐清市虹桥镇、蒲岐镇供水。长江委设计院组建的监理站承担了该系统从工程招标到施工实施全过程的工程建设监理。监理人员深
交通工程施工技术管理中存在的问题会严重影响到交通工程的质量,因此施工企业需要针对影响交通工程施工质量的种种因素,来做好相应的防护措施并根据施工实际情况制定出应急方
1989年通过的《中华人民共和国城市居民委员会组织法》(以下简称《居委会组织法》)实施20多年来,社区居委会在实践中出现自治性不断弱化,与群众联系越发疏离等问题。对于这些
根据穿孔时轧辊的布置特点,导出了空间变形区模型条件下的穿孔顶头辗轧段锥角的计算公式,比较了不同送进角时按照目前所采用的三种计算方法所计算的穿孔顶头辗乳段锥角的差异