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研究目的：探索PcG (Polycomb Group)家族蛋白的成员之一色素框同源蛋白7(Chromobox Protein Homolog7,CBX7)对胃癌干细胞自我更新能力、克隆增殖能力等干细胞相关特性的调节作用,并探索CBX7调控胃癌干细胞样特性的作用机制。研究方法：采用无血清悬浮培养的方法从胃癌细胞系中分离出胃癌干细胞样亚群,Western blot检测胃癌干细胞样亚群与贴壁细胞比较干细胞相关因子Oct4. CD44. CD24及PcG家族蛋白CBX7表达的差异。基因转染下调胃癌细胞中CBX7表达,荧光显微镜下观察转染效率,Western blot检测基因下调效果,无血清悬浮培养、平板克隆等检测CBX7表达下调后胃癌干细胞样特性的变化。Western blot检测CBX7下调后下游已知靶基因p16、E-cadherin和可能靶基因pAkt、pERK表达变化,RT-PCR检测CBX7下调后miR-21表达改变。同时Western blot检测胃癌悬浮干细胞球与贴壁细胞比较CBX7下游已知靶基因p16及可能靶基因pERK, pAkt表达的差异,RT-PCR检测miR-21表达的差异。在胃癌细胞中下调p16表达,观察胃癌干细胞样特性的变化。采用共转染的方法,在胃癌细胞中同时干扰CBX7和p16表达,观察胃癌干细胞样特性的变化。主要结果：1.MKN28. SGC-7901、NCI-N87胃癌细胞系能在无血清悬浮培养条件下产生干细胞球,而MKN45、HGC-27胃癌细胞系在无血清悬浮培养条件下不能形成干细胞球。MKN28、SGC-7901胃癌悬浮干细胞球较贴壁细胞明显高表达CBX7和干细胞相关因子Oct4, MKN28胃癌悬浮干细胞球高表达干细胞表面标志分子CD24,不表达CD44,而SGC-7901胃癌悬浮干细胞球高表达干细胞表面标志分子CD44, CD24表达无明显差异。2.基因转染下调胃癌细胞CBX7表达后,胃癌细胞悬浮培养成球率下降,克隆形成率降低。3.基因转染下调胃癌细胞CBX7表达后,SGC-7901细胞中p16、E-cadherin表达上升,且pAkt、pERK表达下降,Akt、ERK表达无明显改变,miR-21则表达下降。MKN28、AGS细胞中pAkt、pERK表达下降,Akt、ERK表达无明显改变。4. MKN28、SGC-7901胃癌干细胞球与贴壁细胞比较,pAkt表达无明显差异,pERK表达略有下降,SGC-7901胃癌干细胞球低表达p16, western blot未检测到MKN28细胞p16表达,MKN28胃癌干细胞球较贴壁细胞比较miR-21表达无明显变化。5. ATM/p53在MKN28胃癌干细胞球中表达降低,而在SGC-7901胃癌干细胞球中无明显改变。6.干扰胃癌细胞p16表达后,胃癌干细胞自我更新能力、克隆增殖能力明显增强。在下调CBX7表达的胃癌细胞中同时干扰p16表达后,胃癌干细胞自我更新能力、克隆增殖能力等干细胞相关特性得以恢复。结论：1.CBX7在胃癌干细胞悬浮球中高表达,其在调控胃癌干细胞样细胞自我更新能力、克隆增殖能力等特性中发挥重要作用。2.不同胃癌细胞系中肿瘤干细胞标志物存在差异。3. pAkt、pERK是新发现的CBX7下游靶基因,且CBX7亦可调节miR-21的表达。4.在p16表达的胃癌细胞中,CBX7通过抑制p16表达调控胃癌干细胞自我更新、克隆增殖等干细胞相关特性；在p16缺失的胃癌细胞中,CBX7调控胃癌干细胞样特性的作用机制须进一步探索。5.基于不同肿瘤细胞系生物学特性不同,其肿瘤干细胞特性的调节机制存在差异。