论文部分内容阅读
目的:
观察中药复方肤敏提取物外用对过敏性皮肤损伤的治疗和修复作用,为诠释该复方“祛腐生肌”之功效和应用,拓展肤敏的给药途径及其研发提供实验依据。
方法:
1.用2,4-二硝基氯苯(DNCB)接触豚鼠皮肤,使之产生过敏性反应,12d后在豚鼠腹部皮肤上再次用DNCB攻击,攻击部位形成迟发型超敏反应(DTH),并伴有皮损现象。肉眼观察皮损的愈合时间、形态及皮损愈合后取皮损部位皮肤做病理切片观察皮损部位表皮层、炎性细胞浸润及胶原的变化。在豚鼠背部皮肤涂抹高浓度DNCB致敏接触的同时也造成皮肤组织凝固性坏死,从而建立化学性灼伤的皮损模型。肉眼观察皮损的愈合时间、形态及愈合后皮肤病理切片皮损部位表皮层、炎性细胞浸润、充血、胶原、皮肤附属器等的变化。
2.将一定量的磷酸组胺溶液涂抹于动物的破损皮肤表面可以引起动物过敏性瘙痒。以每只豚鼠涂抹磷酸组胺的总用量(μg)为止痒阈值,以止痒阈值为指标,观察复方肤敏外涂的止痒作用。
3.每天给药后30min距小鼠35cm处,用紫外灯照射3h,连续照射15d,造成小鼠皮损。测定皮肤中超氧化物歧化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)含量,病理切片观察表皮、皮肤水肿及胶原变化。
4.行兔耳增生性瘢痕模型手术。测量给药第14d、21d、28d瘢痕的增生厚度,描绘给药第0d、4d、8d、12d、16d时创面愈合面积,记录愈合时间,计算瘢痕增生值、创面愈合率。给药第14d、21d、28d随机取皮损部位做病理切片观察表皮、表皮钉角、胶原排列等变化。
5.把肤敏高、低剂量的溶液紧密接触兔的完整皮肤和破损皮肤,观察皮肤有无红斑、水肿现象。
结果:
1.豚鼠DTH实验结果表明:肤敏能够显著缩短DTH致皮损的愈合时间。观察期内肤敏高、低剂量组较空白对照组皮损程度轻,皮肤愈合后较平整、完好。病理切片观察发现空白对照组炎性症状明显,鳞状上皮部分基底细胞液化,表皮层局部有脓疱,真皮出血、充血、水肿,大量炎性细胞浸润。肤敏高、低剂量组较空白对照组炎性症状减轻,无明显充血及少量淋巴细胞浸润,皮肤附属器较明显,胶原与正常皮肤接近。
DNCB致豚鼠皮肤损伤实验结果表明:肤敏能显著缩短灼伤皮肤愈合的时间。病理切片观察,空白对照组真皮内成纤维细胞增生明显,真皮浅层充血明显,局灶出血。肤敏高、低剂量组能减轻真皮层充血,减少成纤维细胞过度增生。
2.磷酸组胺致豚鼠过敏性瘙痒的实验结果表明:与空白对照组比较肤敏高、低剂量组可使磷酸组胺用量显著增加(P<0.01)。
3.紫外线致皮损的实验结果表明:与空白对照组比较,肤敏高、低剂量组能显著提高皮肤SOD活力、降低MDA含量,差异有显著性意义(P<0.01)。病理切片观察发现:空白对照组真皮层水肿,小血管扩张充血,少许淋巴细胞散在侵润。肤敏高、低剂量组炎性症状明显减轻,真皮层无水肿,淋巴细胞浸润少见。
4.兔耳瘢痕模型实验结果表明:与空白对照组相比,肤敏在第8d愈合效果显著,在第4周抑制瘢痕的增生效果显著。病理观察结果显示,空白对照组,愈合初期溃疡深,成纤维细胞增生,炎性渗出,角化过度伴角化不良,真皮层显著充血;愈合后成纤维细胞及胶原增生明显,毛细血管壁变薄,鳞状上皮稍厚。肤敏在愈合阶段能够促进成纤维细胞增生、表皮增厚,加快鳞状上皮化,毛细血管基本不充血;在愈合后期成纤维细胞增生减少,毛细血管重建为小动脉和小静脉,表皮逐渐变薄与正常皮肤接近。
5.皮肤刺激性实验结果表明,肤敏对兔完整皮肤和破损皮肤均无刺激性。
结论:
肤敏提取物外用对DNCB所致的DTH和化学性灼伤所致皮损有促进愈合作用;对机械性皮肤损伤,既能促进伤口愈合,又能抑制疤痕的形成;对紫外线照射引起的皮肤损害,能够提高皮肤抗氧化的能力,维持皮肤的完整性;对过敏性皮肤瘙痒,有显著的止痒作用,且对皮肤无明显的刺激性。以上结果表明肤敏提取物外用对过敏性皮损有较好的促进修复作用,值得进一步研究开发。