目的：调查NICU院内感染主要病原菌种类及其耐药性,提高抗感染经验性治疗的准确率及有效率，减少药物耐药形成；分析NICU院内感染发生率、部位分布及危险因素，寻找临床上可干预的可控因素。　　方法：连续收集2012年1月1日-2013年1月1日之间在我院NICU住院超过48小时患者临床资料及送检标本病原学检查结果，分析病原菌种类和耐药性及院内感染危险因素。　　结果：1.NICU共分离出病原菌588株，主要病原菌依次：肺炎克雷伯杆菌，鲍曼不动杆菌，金黄色葡萄球菌，真菌；革兰氏阴性细菌为主要致病菌。2.2012年主要细菌分离率上升，真菌分离率明显降低。3.肺炎克雷白杆菌对大多数抗菌药物耐药，对亚胺培南及美罗培南耐药率最低（5％）；鲍曼不动对大多数抗菌药物耐药，对阿米卡星耐药率最低，其次为亚胺培南、舒普深；金黄色葡萄球菌检出率为11.4及11.6%，MASA检出率为75%及79%，2年内未检出耐万古霉素、利奈唑胺及呋喃妥因菌株；大肠埃希菌对碳青霉烯类药物保持最低耐药率，未发现亚胺培耐药菌株；铜绿假单胞对碳青霉烯类美罗培南中介，2012年未发现庆大霉素、亚胺培南、妥布霉素耐药株；4.本调查显示NICU院内感染发生率为31.67%，其中以下呼吸道最为常见，其次为泌尿系感染，胃肠道感染居第3.5. logistic回归分析结果显示：年龄>60岁、吸烟、Glagsow评分<8、抑郁状态、留置胃管、机械通气、导尿、脱水治疗、抑酸治疗、预防性使用抗生素是NICU院内感染的独立危险因素。　　结论：1.连续2年NICU感染病原菌以革兰阴性杆菌为主；2.检出主要细菌为肺炎克雷伯、鲍曼不动杆菌及金葡菌，细菌对大部分抗生素普遍耐药。3.真菌分离率明显下降；4.院内感染发生率为31.67%，下呼吸道感染最常见.5.年龄>60岁、吸烟、Glagsow评分<9、留置胃管、机械通气、导尿、脱水治疗、抑酸治疗、预防性使用抗生素、抑郁状态是NICU院内感染的独立危险因素。