论文部分内容阅读
癌症是威胁人类健康的一个医学难题。目前化学药物治疗是最常见最普遍的治疗方式之一。但是小分子化疗药普遍存在水溶性差,靶向性低,毒副作用大的问题,阻碍了许多药物的临床应用。纳米药物可以提高小分子化疗药的水溶性,提高对肿瘤的靶向性和降低毒副作用。血管阻断剂是一种具有较好发展前景的肿瘤治疗药物,它通过破坏肿瘤血管,阻断肿瘤细胞的氧气和养分供应,达到抑制肿瘤细胞的目的。康普瑞汀A4纳米粒子(CA4-NPs)是一种高分子血管阻断剂,可以显著抑制肿瘤生长,对肿瘤有较好的被动靶向性,毒副作用小,是一种具有研究前景的抗肿瘤纳米药物。但是CA4-NPs治疗后,肿瘤微环境中具有免疫抑制作用的M2型巨噬细胞增多,导致免疫抑制微环境,引起肿瘤的复发,治疗效果受到限制。BLZ945是一种CSF-1R抑制剂,可以用于抑制肿瘤中M2型巨噬细胞的浸润和生存,从而缓解免疫抑制微环境,并提高CA4-NPs的肿瘤治疗能力。但是CSF-1R广泛存在,并且BLZ945有潜在的肝毒性,因此有必要建立肿瘤靶向性药物递送系统来提高BLZ945对肿瘤的靶向性并降低BLZ945的脱靶和副作用。在本论文中,我们设计并制备了具有凝血靶向功能的BLZ945纳米药物,并与CA4-NPs联合用于肿瘤治疗,旨在通过向肿瘤靶向递送BLZ945,特异性调节肿瘤免疫,提高肿瘤治疗效果,逆转免疫抑制微环境。本论文的主要研究内容和结论如下:(1)首先我们设计制备了具有凝血靶向功能的BLZ945纳米药物A15-BLZ-NPs。为了提高载体材料聚乙二醇嵌段聚丙交酯共聚物(PEG5k-PLA5k)对BLZ945的担载能力,我们首先利用丙交酯开环聚合制备了 BLZ945-PLA。然后使用PEG5k-PLA5k担载BLZ945-PLA,再在粒子表面的PEG链段上修饰凝血因子底物多肽A15,制备得到A15-BLZ-NPs纳米药物。A15-BLZ-NPs可以在凝血因子的作用下特异性靶向CA4-NPs治疗后引起的肿瘤凝血点。A15-BLZ-NPs具备合适的粒径,在体外能保持相对稳定,在不同pH环境(pH 7.4和pH 6.8)下可以持续释放BLZ945,并且对巨噬细胞的生存和增殖有抑制作用。(2)我们将BLZ945纳米药物A15-BLZ-NPs与CA4-NPs联合用于肿瘤治疗。我们首先证明了 CA4-NPs可以提高BLZ945在肿瘤中的分布,肿瘤内BLZ945浓度是A15-BLZ-NPs单药组的3.75倍。在结肠癌(C26)肿瘤模型的治疗中,A15-BLZ-NPs+CA4-NPs联用组取得了较好的治疗效果,抑瘤率为73.4%,明显高于CA4-NPs(15.5%)和A15-BLZ-NPs(23.9%)单药治疗组。最后考察了治疗48小时后肿瘤中免疫细胞变化,与CA4-NPs治疗组相比,联用组中免疫抑制性的M2型巨噬细胞比例减少,免疫激活型的M1型巨噬细胞和CD8+毒性T细胞增多,说明免疫抑制微环境被逆转为免疫激活状态,抑制肿瘤生长,从而获得较好的抗肿瘤效果。通过本论文的研究,希望能够为特异性调节肿瘤微环境的纳米药的研究提供基础性实验依据和新策略,为高分子血管阻断剂的进一步研究和应用提供理论和实验基础。