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【目的】研究单独和联合阻断磷酸戊糖途径(Pentose phosphate pathway,PPP)的关键酶转酮醇酶样蛋白1(Transketolase 1ike protein 1,TKTL1)和葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(Glucose-6-phosphate dehydrogenase,G6PD)对体外培养的人类宫颈癌细胞(HeLa)生长增殖的影响,并探索其相关的分子机制。 【方法】分别构建针对人TKTL1基因和针对人G6PD基因的短发卡RNA(Short hairpin RNA,shRNA)质粒载体,并将构建的shRNA分别单独转染及共转染HeLa细胞;采用实时定量PCR(Realtime-PCR,RT-PCR)方法检测转染前后TKTL1以及G6PDmRNA表达量的变化情况;酶联免疫吸附剂测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)法检测转染前后G6PD及转酮醇酶(transketolase,TK)酶含量变化;噻唑蓝法(3-(4,5)-dimethylthiahiazo(-z-y1)-3,5-di-phenytetrazoliumromideo,MTT)检测转染前后细胞增殖状态的变化;RT-PCR检测转染前后肿瘤蛋白P53(tumor protein p53,P53)、低氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor1,HIF-1α)及蛋白激酶B1(Protein Kinase B,1Akt-1)表达变化。 【结果】TKTL1单转组(T组)的TKTL1mRNA表达水平明显低于阴性对照组(转染空质粒载体组,NC)(P<0.05)和未转组(P<0.05);G6PD单转组(G组)的G6PDmRNA水平明显低于NC(P<0.05)和未转组(P<0.05);而共转组的TKTL1及G6PDmRNA表达均低于NC(P<0.05)及未转组(P<0.05)。T组和共转组的TK含量比NC和未转组明显降低(P<0.05);G组和共转组的G6PD含量比NC和未转组明显降低(P<0.05)。G组、T组细胞增殖均被抑制(P<0.05),而共转组细胞增殖抑制情况比G组和T组更加明显(P<0.05)。G组、T组和共转组P53及Akt-1表达均明显降低(P<0.05)。而G组、T组和共转组HIF-1α表达分别为未转组的245％(P<0.05)、88%(P<0.05)、44%(P<0.05)。 【结论】PPP在人类宫颈癌细胞(HeLa)生长增殖中起重要作用;PPP对肿瘤细胞恶性程度、侵袭转移、预后存活影响的分子机制可能与反向调节P53、HIF-1α及Akt-1有关;通过TKTL1、G6PD单独或者联合阻遏PPP代谢可能成为肿瘤治疗新的研究热点。