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目的:观察电针傍刺对褥疮大鼠局部血流灌注量的影响,明确电针傍刺促进创面愈合的作用,观察电针傍刺对褥疮大鼠创面组织中p38MAPK信号通路关键因子的影响,探讨电针傍刺促进创面修复的作用机制。方法:将雌性SD大鼠用自制装置固定其腿部近膝关节骨隆突造模处,采用缺血再灌注损伤方式建立褥疮创面,创面以II期褥疮形成为标准。将SD大鼠随机分为正常组、模型组、电针组、模型抑制剂组和电针抑制剂组5组。每组按干预时间1d、3d、5d、7d、9d分为5个亚组,每个亚组6只。正常组给予与SB203580等体积的生理盐水;模型组造模后给予等体积的生理盐水,再行碘伏常规治疗;电针组造模后给予等体积的生理盐水,再行电针傍刺治疗;模型抑制剂组于造模后给予p38抑制剂SB203580(5mg/kg),再给予碘伏常规治疗;电针抑制剂组于造模后给予p38抑制剂SB203580,再给予电针傍刺治疗。电针傍刺方法:大鼠造模后第二日评价模型,造模成功的于第三日开始治疗,将大鼠固定于针刺操作台上,创面中心直刺1针,距创面边缘0.5cm的正常皮肤处斜刺1针,不施针刺手法,然后连接微电流电刺激仪。其中,负极置于皮肤创面中心的针柄上,正极置于创面边缘的针柄上,电流500μA,频率0.5Hz,持续30min,1次/日。本实验采用透绘法求积仪测定褥疮大鼠不同时间点创面的愈合率,观察创面的愈合时间;采用PeriCamPSI血流视频成像系统监测褥疮大鼠不同时间点治疗前后局部皮肤血流灌注量,观察正常组、模型组、电针组、模型抑制剂组及电针抑制剂组褥疮大鼠在1d、3d、5d、7d、9d时间点的创面血流灌注量;采用免疫组化的方法,检测各组褥疮大鼠不同时间点创面组织p3 8MAPK和HSP27蛋白的表达,检测不同时间点CD34微血管计数;采用WesternBlot方法,分别检测各组褥疮大鼠不同时间点创面组织中p38MAPK和HSP27蛋白的表达;采用Realtime-PCR法检测各组褥疮大鼠不同时间点创面组织中p38mRNA和HSP27mRNA的表达。结果:1.第一部分创面愈合率和愈合时间结果显示:除1d外,电针组与模型组创面愈合率相比,有显著性差异,电针组优于模型组。电针组与模型组愈合时间相比,有显著性差异。给予SB203580后,愈合率下降,愈合时间延长。2.第二部分血流灌注量结果显示:1d,其他四组与正常组比较创面的血流灌注量有显著性差异(P<0.05);9d,其他四组与正常组比较创面的血流灌注量无显著性差异(P>0.05)。电针组和模型组在1d、3d、5d、7d、9d时间点创面的血流灌注量呈下降趋势,电针组在每个时间点治疗后较治疗前创面皮肤的血流灌注量显著增加(P<0.05),而模型组在每个时间点治疗前后创面皮肤的血流灌注量无显著性差异(P>0.05)。给予SB203580后,电针抑制剂组与电针组相比及模型抑制剂组与模型组相比创面皮肤的血流灌注量无明显的变化。3.免疫组化结果显示:1d,电针组和模型组创面组织中p38MAPK和HSP27阳性细胞数较正常组明显增多;电针组在3d、5d、7d、9d时间点p38MAPK和HSP27阳性细胞数逐渐下降,而模型组在3d时p38MAPK和HSP27阳性细胞数最高,在5d、7d、9d时间点p38MAPK和HSP27阳性细胞数逐渐下降。模型组p38MAPK和HSP27蛋白表达峰值在3d,而电针组p3 8MAPK和HSP27蛋白表达峰值在1d。给予SB203 580后,电针抑制剂组与电针组相比及模型抑制剂组与模型组相比各时间点p38MAPK和HSP27阳性细胞数均降低。电针组在5d时CD34标记的周围组织微血管计数高于其他时间点,而模型组在7d时CD34标记的微血管计数高于其他时间点。4.Western Blot结果显示:1d,模型组与电针组创面组织中p38MAPK和HSP27蛋白表达较正常组显著升高(P<0.05);电针组在3d、5d、7d、9d时间点p38MAPK和HSP27蛋白表达逐渐下降,而模型组在3d时p38MAPK和HSP27蛋白表达增高,在5d、7d、9d时间点p38MAPK和HSP27蛋白表达降低。模型组p38MAPK和HSP27蛋白表达峰值在3d,而电针组p38MAPK和HSP27蛋白表达峰值在1d。给予SB203580后,电针抑制剂组与电针组相比及模型抑制剂组与模型组相比各时间点p38MAPK和HSP27蛋白表达均下降。5.Realtime-PCR结果显示:1d,模型组与电针组p38MAPKmRNA和HSP27mRNA表达均较正常组增高(P<0.05);电针组在3d、5d、7d、9d时间点p38MAPKmRNA和HSP27mRNA表达逐渐下降,而模型组在3d时p38MAPKmRNA 和 HSP27mRNA 表达增高,在 5d、7d、9d 时间点p3 8MAPKmRNA 和 HSP27mRNA 表达降低。模型组 p38MAPKmRNA 和HSP27mRNA 表达峰值在 3d,而电针组 p38MAPKmRNA 和 HSP27mRNA表达峰值在1d。给予SB203580后,电针抑制剂组与电针组相比及模型抑制剂组与模型组相比各时间点p3 8MAPKmRN A和HSP27mRNA表达均下降。结论:1.电针傍刺能够促进褥疮大鼠创面的修复,缩短创面愈合时间。2.电针傍刺能够增加褥疮大鼠创面的血流灌注量,促进创面的修复。3.p38MAPK信号转导通路参与并促进褥疮大鼠创面的修复,应用p38MAPK信号转导通路的特异性抑制剂SB203580,会延长创面愈合的时间。4.电针傍刺能够促进p38MAPK信号转导通路中p38MAPK及其下游的HSP27蛋白及基因的表达,进而发挥促进创面修复作用。而p38MAPK特异性抑制剂SB203580能够显著抑制电针傍刺通过p38MAPK信号转导通路促进创面修复的治疗作用。5.p38MAPK信号转导通路是电针傍刺作用的重要靶点,并且是电针傍刺促进褥疮大鼠创面修复的可能作用机制之一。