目的顺铂是一种广泛使用的化疗药物,可用于治疗多种癌症,但其副作用如耳毒性限制了其使用。顺铂耳毒性导致听力下降和耳鸣,对患者生活质量影响严重。目前用于治疗顺铂引起的听力损失的药物非常少,且治疗效果不明确,因此寻找有效的抗顺铂耳毒性的药物非常重要。顺铂对于听觉细胞损伤的方式主要是诱导细胞凋亡,涉及到多种信号通路和细胞因子,PI3K/AKT通路是其中一个重要的通路。因此,本研究旨在研究PIK3CA结合紧密并且用顺铂处理后,能够保护听觉毛细胞、保护听力的天然化合物,筛选出其中结合最紧密、保护效果最好的天然化合物——辛可宁和其同分异构体辛可尼丁,以此天然化合物为研究重点,探究其保护听力的可能机制,为听觉保护找到新的潜在靶点。方法在本研究中,我们以PIK3CA蛋白为靶点通过分子对接及分子动力学模拟,从天然化合物库中筛选出能与其紧密结合的产物——辛可宁和辛可尼丁。体外培养P2新生小鼠Corti器,用顺铂和辛可宁（以及辛可尼丁）对体外Corti器进项单加处理和合并处理。用Parvalbumin和Myosin 7a免疫荧光染色评估Corti器中毛细胞的形态和数量;通过Cleaved Caspase-3和TUNEL免疫荧光定量毛细胞凋亡;通过Mito SOX Red染色评估Corti器中毛细胞中线粒体内活性氧水平;用TUJ-1染色观察新生小鼠耳蜗螺旋神经元和神经纤维的形态、数量。在HEI-OC1细胞中,观察评估在顺铂损伤下,辛可宁和辛可尼丁对HEI-OC1细胞的保护作用。用细胞增殖和毒性检测试剂（cell counting kit-8,CCK8）检测细胞活力;通过Mito SOX Red评估HEI-OC1细胞中线粒体内活性氧变化,TMRM评估细胞线粒体膜电位水平差异,分别用免疫荧光技术和流式细胞术对线粒体相关变化进行定性、定量;通过蛋白免疫印迹检测凋亡相关蛋白Caspase 3、Cleaved Caspase 3的表达,验证PI3K/AKT通路上相关蛋白（PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT）的调控。最后通过细胞活力检测试剂盒,检测PI3K抑制剂（LY294002）或AKT抑制剂（MK-2206）与顺铂以及辛可宁或辛可尼丁共处理的细胞活力。结果1、辛可宁和辛可尼丁可以与PIK3CA蛋白相互结合并形成稳定的化合物。2、辛可宁和辛可尼丁预处理后合并顺铂处理,可以减少顺铂导致的新生鼠耳蜗Corti器的毛细胞数量减少。3、辛可宁和辛可尼丁与顺铂共处理,可以减少新生小鼠体外Corti器中毛细胞凋亡和ROS积累。4、用辛可宁和辛可尼丁预处理后再给予顺铂损伤,可减少顺铂导致的HEI-OC1细胞活力下降,及线粒体功能障碍和ROS积累。5、辛可宁和辛可尼丁能抑制顺铂导致的体外新生小鼠耳蜗螺旋神经节神经元损伤、神经纤维的中断和缩短。6、用辛可宁和辛可尼丁预处理,通过PI3K/AKT信号通路,降低顺铂引起的凋亡相关蛋白的表达。7、PI3K抑制剂（LY294002）或AKT抑制剂（MK-2206）共处理后,辛可宁或辛可尼丁对顺铂损伤的HEI-OC1细胞保护作用被阻断。结论我们以新生鼠耳蜗Corti器和HEI-OC1细胞为模型,证实了辛可宁和其同分异构体辛可尼丁可通过PI3K/AKT通路,减少顺铂导致的新生小鼠体外Corti器和HEI-OC1细胞凋亡、线粒体氧化应激,从而降低顺铂引起的耳毒性,最终达到保护听觉毛细胞的作用,也提示其可以作为治疗顺铂引起的听力损失的潜在治疗药物。