东北虎(Panthera tigris altaica)是国家一级保护动物，我国现存野生东北虎的数量很少，而人工圈养的东北虎又存在近亲繁殖的现象。对东北虎的精液进行超低温冷冻保存研究，为将来建立精液的种质资源库，通过人工授精在圈养虎和野生虎之间进行基因交流，避免近亲繁殖造成的种群退化，增加虎基因的多样性，对于更加有效的保护东北虎具有十分重要的意义。本研究对17只东北虎进行了23次电刺激采精，并对取得精液进行品质分析。结果表明，不同虎个体对电刺激采精的电压敏感度不同，在平均电压为4.78±1.3伏时射精。所采集精液量平均为4.02±1.18mL，pH值为7.05±0.26，精子密度为23.43±33.87×10~6个／mL，精子活率为62.9±19.96％，畸形率为45.06±14.96％。从总体上看12月份和1月份采精效果最好，有精率占全年的57.2％，10月和11月的采精效果最差，无精率占全年的44.4％，表明东北虎精液品质受季节影响。通过比较果糖和葡萄糖两种冷冻稀释液对精子的保护情况，发现果糖冷冻稀释液对虎精子的保护效果较好，冻融后精子活率达到58.85％，畸形率为58.88±11.88％，顶体完整率为82.43±4.04％；葡萄糖冷冻稀释液，解冻后精子活率为13.83％，畸形率为63.1±1.7％，顶体完整率为83.1±8.3％。用扫描电镜和透射电镜对东北虎精子形态和结构的观察表明，东北虎精子全长52.57±1.25μm，可分为头部和尾部。在头部和尾部颈段处及尾部中段前方常见原生质滴，内含线粒体。头部：正面呈圆形长约为3.98±0.58μm；宽约3.41±0.59μm。颈段：颈段是连接头部和尾部的结构，颈段较短0.66±0.106μm，内含中心粒和节柱。中段：长8.627±1.166μm，由线粒体包围，线粒体为31-34旋，轴丝为常见的“9+2”结构。主段和末段长39.31±1.25μm。冷冻对于精子损伤主要表现在质膜和线粒体，而这些变化会在不同程度上引起受精率的下降。精子在冻融过程中质膜易发生膨胀或断裂、顶体囊泡化或溃散，而质膜和顶体丢失现象较少。可见，冷冻保护液只能一定程度的保护精子，冷冻对于精子的损伤是不可避免的。