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背景糖尿病神经病理性疼痛(DNP)是一种常见的糖尿病并发症。蛋白质糖基化形成晚期糖基化终末产物(AGEs)可能与DNP的发生以及全身性炎症反应有关。吡哆胺是一种AGEs抑制剂,动物和临床研究已证实,吡哆胺可以抑制一系列糖尿病相关器官损伤的病理过程,缓解某些类型的神经病理性疼痛。他汀类药物主要用于高胆固醇血症的治疗,近年来有学者发现他汀类药物有一定的缓解疼痛的作用。此外,他汀类药物还有抗炎抗氧化的作用。课题组设计了两部分动物实验分别验证吡哆胺和辛伐他汀能否缓解DNP以及减轻全身性炎症反应,并探索其机制。方法在第一部分的研究中,将雄性SD大鼠随机分配到正常+无菌水(NW)组、糖尿病+无菌水(DW)组、糖尿病+吡哆胺(DP)组和正常+吡哆胺(NP)组。利用链脲佐菌素(STZ)腹腔注射的方法建立糖尿病大鼠模型。成功建模后DP组和NP组大鼠每天接受200 mg/kg剂量的吡哆胺灌胃,其他组大鼠每天接受相应体积的无菌水灌胃。建模后在各个时间点记录各组大鼠的血糖、体重、机械痛阈和热痛阈,第28天取腰段脊髓背角和血清保存。采用蛋白印迹法(WB)检测各组大鼠脊髓背角中晚期糖基化终末产物受体(RAGE)的表达以及核转录因子-κB(NF-κB)和丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)的激活程度,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组大鼠脊髓背角中白介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的变化以及血清中晚期糖基化修饰的低密度脂蛋白(AGE-LDL)和氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)的变化,免疫荧光法检测磷酸化NF-κB(p-NF-κB)和RAGE在糖尿病大鼠脊髓背角中的细胞定位。在第二部分的研究中,大鼠被随机分配到正常+介质(NV)组、糖尿病+介质(DV)组和糖尿病+辛伐他汀(DS)组。通过腹腔注射STZ建立糖尿病大鼠模型,成功建模后DS组每天按照15 mg/kg的剂量接受辛伐他汀腹腔注射,NV组和DV组每天接受相应体积的溶剂腹腔注射。建模后在各个时间点记录各组大鼠的血糖、体重、机械痛阈和热痛阈,第28天取腰段脊髓背角和血清保存。WB检测各组大鼠脊髓背角中RAGE、蛋白激酶B(AKT)和MAPKs的表达或激活程度,免疫荧光法检测p-AKT在糖尿病大鼠脊髓背角中的细胞定位,ELISA检测各组大鼠血清中ox-LDL和IL-1β的浓度。结果第一部分的结果显示,吡哆胺可以在一定程度上抑制糖尿病导致的机械痛阈下降,可以抑制糖尿病大鼠脊髓背角中RAGE/NF-κB和细胞外调节蛋白激酶(ERK)通路的激活,对p38和c-Jun氨基末端激酶(JNK)的激活无明显影响。三组大鼠脊髓背角中TNF-α和IL-1β的表达量无明显差别,糖尿病大鼠脊髓背角中p-NF-κB和RAGE都表达在神经元细胞中,在小胶质细胞和星形胶质细胞中无表达。此外,批哆胺可以抑制糖尿病大鼠血清中AGE-LDL和ox-LDL浓度的升高。第二部分的结果显示,辛伐他汀可以在一定程度上抑制糖尿病导致的机械痛阈下降,可以抑制糖尿病大鼠脊髓背角中RAGE/AKT和JNK的激活,对ERK和p38的激活无明显影响,糖尿病大鼠脊髓背角中p-AKT表达在神经元细胞中,在小胶质细胞和星形胶质细胞中无表达。辛伐他汀还可以抑制糖尿病大鼠血清中ox-LDL和IL-1β浓度的升高。结论吡哆胺可以通过抑制糖尿病大鼠脊髓背角神经元中RAGE/NF-κB通路和脊髓背角中ERK的激活缓解DNP,可能通过降低糖尿病大鼠血清中AGE-LDL和ox-LDL的浓度减轻全身性炎症反应,进而缓解DNP。辛伐他汀可以通过抑制糖尿病大鼠脊髓背角神经元中RAGE/AKT通路和脊髓背角中JNK的激活缓解DNP。同时,辛伐他汀可能通过降低糖尿病大鼠血清中ox-LDL和IL-1β的含量减轻全身性炎症反应,进而缓解DNP。