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卤虫(Artemia)隶属于甲壳纲(Crustacea)、无甲目(Anostacea)、卤虫属(Artemia)。卤虫广泛分布于内陆盐湖和海岸盐田中,是一个广温广布种。V-ATPase基因广泛存在于原核生物和真核细胞的胞质膜和细胞管泡膜膜系统中, V-ATPase蛋白能够依靠ATP分解产生的能量作为动力,逆浓度梯度地将H+泵入细胞管泡腔内或泵出细胞外,维持细胞内正常的pH值,保证细胞正常的生理活动,同时也能维持某些细胞器如高尔基体、溶酶体、吞饮小泡和突触小泡内低pH值,这一点对溶酶体的消化功能或受体介导的内吞后受体再循环或高尔基体加工蛋白质等生理活动是必要的.本文根据GenBank上美国卤虫V-ATPase基因的mRNA序列设计引物,以中国卤虫总RNA为模板,经RT-PCR,得到了长1577bp的基因片段,经Blastn比对、ClustalX 1.83软件和MEGA 3.0进行对该序列的假定氨基酸序列和相近蛋白的氨基酸序列进行分子进化分析,确认该序列是中国卤虫V-ATPase基因的序列,与Genebank上Artemia franciscana (AY197611)的相似性97%,根据V-ATPase基因核酸序列,用CLUSTALW (1.82)推断氨基酸序列.V-ATPase基因核酸序列共编码了401个氨基酸序列,与Artemia franciscana的氨基酸序列有98%的相似性.构建的进化树显示它和美国卤虫的V-ATPase亲缘关系最近. Real Time PCR,即实时检测PCR扩增产物并进行解析的方法,至今已经成为基因表达解析的必要手段。本实验应用Real Time PCR技术检测V-ATPase在中国卤虫胚胎发育过程中的表达.在卤虫6个不同胚胎发育时期0h,4h,8h,12h,16h,24h中,V-ATPase的相对表达量是不同的。在卤虫胚胎发育早期12h小时之前,V-ATPase是呈下降趋势,12h过后V-ATPase逐渐上升并在24h小时与16h小时表达量几乎一致。这可能是由于卤虫在胚胎发育12h之前,整体处于一个无氧状态,从而导致V-ATPase相对表达量下降。V-ATPase能够调节H+平衡,将卤虫胚胎细胞内多余的H+排到细胞外,使细胞内呈碱性,阻止细胞凋亡的发生,进而恢复新陈代谢和胚胎发育的过程。这种调节机制对于卤虫适应在无氧条件生存有重要的意义。