卡介苗免疫小鼠T淋巴细胞亚群及其内穿孔素的表达及意义

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目的:探讨卡介苗(BCG)免疫小鼠T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+及CD4+CD8+(双阳,DP)T细胞及其内穿孔素(PFN)的表达及意义。方法:1.实验动物分组:按体重相近的原则将30只清洁级KM雌性小鼠随机分成2组,每组15只:①卡介苗免疫组(BCG组);②卡介苗免疫成功后致病量结核杆菌攻击组(BCG-TB组).2.取血:实验开始时第①、②组每只小鼠给予BCG 0.3ml(相当于湿菌0.1 mg/只)皮下注射;第3个月后第②组每只小鼠均给予1ml TB混悬液(细菌数109)经尾静脉内注射,同时,对照组①组注入相同体积的生理盐水作对照。饲养1个月后两组每只小鼠均经内眦静脉取血1.5-2ml,分别检测外周血中T细胞亚群及其内穿孔素的表达。3.检测:以CD3PerCP、CD4FTTC、CD8APC单抗标记T细胞亚群,以PE标记PFN,以流式细胞仪检测分析总的淋巴细胞、CD3+、CD4+、CD8+、CD4+ CD8+(DP)T淋巴细胞计数和各亚群占淋巴细胞百分率及观察各T细胞亚群内表达PFN阳性细胞计数和各自占淋巴细胞百分率。4.肺组织病理学和细菌学检查。结果:1.小鼠获得卡介苗免疫成功后,受到致病量结核菌攻击时不发病.2.BCG-TB组小鼠CD3+、CD8+、CD8+%、DP T细胞计数高于BCG组(P<0.05),CD4+ / CD8+低于BCG组(P<0.05),差异有统计学意义。3.两组小鼠T细胞亚群均能表达PFN.4.BCG-TB组小鼠表达PFN的CD3+、CD8+、DP T细胞计数高于BCG组(P<0.05),CD4+ / CD8+低于BCG组(P<0.05),差异有统计学意义。5.BCG-TB组小鼠肝脾肺组织切片未见结核病灶,抗酸染色未见结核杆菌。结论:(1)BCG免疫可提高宿主抵抗结核病的免疫力,增强抗结核保护性免疫表现为CD8+T、DP T细胞升高及T细胞内PFN表达的升高.(2)CD8+T、DP T细胞是抗结核保护性免疫相关细胞.(3)PFN表达升高是机体抗结核保护性免疫表现之一。
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