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目的：酒精对心脏发育的致畸作用已经明确，但机制尚不清楚，心脏的发生和早期发育是一个起源于干细胞的极其复杂的增殖和多因子诱导分化调控过程，本研究以间充质干细胞C3H10T1/2为研究对象，通过体外培养过程中酒精的干预，观察其对C3H10T1/2生物学特性及向心肌样细胞分化的影响，从细胞增殖及分化能力方面探讨酒精致畸的可能机制。方法：应用MTT比色法观察酒精对间充质干细胞C3H10T1/2的毒性作用并筛选出低、高浓度干预组，在不同培养时间点检测细胞吸光值并绘制生长曲线；不同浓度酒精干预48h后应用流式细胞仪检测细胞周期的变化，应用Q-PCR和Western blot方法检测各组干细胞表面标志Oct-4的表达水平变化。研究酒精干预后对C3H10T1/2向心肌样细胞分化的影响时，分为四个实验组：BMP2诱导组，酒精+BMP2诱导组，C3H10T1/2组和阳性对照组，诱导后1、2、3、4周4个时间点应用Q-PCR检测心脏发育相关基因GATA4、MEF2C的表达情况，Western blot检测心肌特异性蛋白cTnT、Cx43的表达情况。结果：间充质干细胞C3H10T1/2在37℃、5%CO2的细胞培养孵箱中生长状态良好，增殖速度快，2-3d可传代。MTT筛选出50mM、100mM、200mM浓度的酒精作为干预浓度，50mM酒精对细胞增殖未产生显著影响（P>0.05），200mM酒精对细胞抑制率为20％左右（P<0.05）。各组间细胞周期未见显著差异（P＞0.05），但与空白组相比，200mM酒精组细胞处于G2期比例有下降趋势、处于S期比例则有增加的趋势，G2/G1较空白组增大。各组间干细胞表面标志Oct-4的表达在基因及蛋白水平均无显著差异（P>0.05）。C3H10T1/2细胞加入BMP2诱导后细胞折光性增强，呈梭形，细胞间连接紧密且排列趋向一致。BMP2诱导组和酒精+BMP2诱导组GATA4的表达在诱导的第1周开始升高，第2周达高峰，MEF2C的表达在第2周升高，第3、4周达高峰，两组间无显著差异（P>0.05），但表达量仍明显低于阳性对照组（P<0.05），而空白组为持续低表达量。BMP2诱导组和酒精+BMP2诱导组在诱导的第3周出现cTnT、Cx43的表达，两组间无显著差异（P>0.05），但仍低于阳性对照组（P<0.05），空白组未见相关蛋白的表达。结论：酒精抑制C3H10T1/2细胞的增殖，且抑制作用呈现剂量依赖性；实验所用浓度酒精虽未对细胞周期产生显著影响，但提示200mM酒精组细胞发生S期阻滞从而抑制细胞增殖；酒精不影响干细胞标志物Oct-4的表达，对干细胞细胞向心肌样细胞分化的能力亦无显著影响，提示酒精可能并未通过影响Oct4的表达进一步影响细胞分化能力来产生致畸作用。