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本论文通过2个试验研究由本实验室自主研发的木聚糖酶基因酵母工程菌的适宜发酵培养基、重组酶的酶学性质及其对生长猪生产性能和肠道微生物组成的影响,为该木聚糖酶在饲料工业中的推广应用提供试验数据。试验一木聚糖酶毕赤酵母工程菌的发酵培养基优化及重组酶酶学性质研究本实验室在前期研究中成功构建了一株具有潜在应用价值的酵母基因工程菌PX-1,为进一步提高分泌水平、降低生产成本,试验一对PX-1发酵的培养基进行了优化。结果表明,用葡萄糖替代传统工业培养基中的甘油,培养时间可减少4h,但酵母生长期的细胞密度和诱导期的产酶能力都明显下降。改变甘油培养基配方,降低基础盐浓度,在同等pH和温度条件下,与传统甘油培养基比较,细胞密度提高到1.2倍,比用葡萄糖培养时提高1倍;产酶能力和传统甘油培养基接近,且缩短了诱导时间,节约了成本。对所得产品PTX2进行酶学性质分析表明,该酶的最适pH为5.5,最适温度为55℃;50℃以下在150min内比较稳定,70℃时在30min内几乎完全失活;不同种类和浓度的金属离子对该酶的影响不同。试验二小麦饲粮添加木聚糖酶对生长猪生产性能和肠道微生物组成的影响本试验旨在考察小麦基础饲粮中添加不同水平重组木聚糖酶(PTX2)对生长猪生产性能、养分消化率和消化道微生物菌群的影响。选择80头健康DLY猪(平均体重40kg)随机分为5个处理,每个处理4个重复,每个重复4头猪,分别饲喂玉米—豆粕饲粮(正对照)、小麦—豆粕饲粮(负对照)和添加有不同水平重组木聚糖酶(500、1000和2000U/kg)的小麦—豆粕饲粮(试验组),试验期28d。结果表明,小麦基础饲粮中添加木聚糖酶可显著提高生长猪平均日增重(P<0.01)、平均日采食量(P<0.05)和养分消化率(P<0.05);上述效应与木聚糖酶添加水平有关,其中添加高水平(2000U/kg)时效果最好。饲粮添加木聚糖酶显著提高生长猪血清葡萄糖、木糖和甲状腺激素(T3、T4)水平,降低尿素氮水平(P<0.05)。饲粮组成显著影响猪消化道微生物菌群结构,加酶可以维持动物消化道微生物区系平衡。上述结果表明,由本实验室自主研发的基因重组木聚糖酶具有明显的改善生长猪小麦豆粕型饲粮养分消化率和猪生产性能与肠道微生态环境的功效。综上所述,木聚糖酶毕赤酵母工程菌发酵的最适培养基是甘油低浓度培养基,所得酶产品的最适pH为5.5,最适温度为55℃;小麦饲粮中添加该酶可显著改善生长猪生产性能,提高养分消化率,维持动物消化道微生物区系的平衡,其适宜添加水平为2000U/kg。