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目的：USP22是一种新型的去泛素化水解酶，广泛表达于各种成年组织胚胎的早期。并且，联合检测USP22和Polycomb/肿瘤干细胞信号其它成员，可以预测肿瘤是否具有侵略性和耐药性等特点，使癌症病人的诊断和病情级别的划分成为可能。虽然USP22的功能尚未完全明确，但是已发现其在DNA转录、Myc介导的细胞恶变以及细胞周期进程中发挥重要作用。结合现有文献报道，USP22复合物启动的基因在癌细胞发生更具侵袭性和转移性的改变中具有非常重要的作用。故此实验的目的在于探讨USP22在结直肠癌中的活化状态并分析其可能的机制。
方法：1、收集2001-2003年间192例结直肠癌患者的组织蜡块，包括正常粘膜27例、腺瘤27例、原发肿瘤192例、淋巴结转移灶22例、肝转移灶15例。其中，正常粘膜、腺瘤及腺癌均取自同一患者；转移灶与原发灶相配对。通过免疫组化的方法检测并分析USP22的表达情况及其临床意义；2、收集2006-2007年问82对临床结直肠癌患者的新鲜癌旁粘膜和配对的癌组织，提取cDNA和蛋白，通过定量PCR及Western blot方法检测并分析USP22及其下游靶点之问的关联性；3、采用shRNA技术干扰USP22在结直肠癌细胞系中的表达，通过Western blot和流式细胞仪方法检测并分析USP22的致癌机制。
结果：1、免疫组化显示USP22染色除少量表达于炎性细胞外，主要表达于结直肠上皮细胞的细胞核中。随着肿瘤的发生及肝转移的进展，USP22的表达量逐渐增高（P<0.0001和P=-0.021）。在192例标本中，USP22的阳性率为54.6％，与患者的性别、肿瘤大小、大体类型、肿瘤浸润、淋巴结情况、临床分期和Ki-67的表达显著相关（P<0.05）。高表达USP22的患者其总生存和无瘤生存期显著缩短(P<0.0001)。Cox多元回归分析示USP22为患者预后的独立影响因素。2、在82对新鲜标本中，USP22、BMI-1、c-Myc和cyclin D2的mRNA高表达的几率（4倍于内参的表达）分别为30.5％、45.1％、43.9％和68.3％。统计学分析显示，在mRNA水平上，USP22BMI-1(r=0.790，P<0.0001)、c-Myc(r=0.528，P<0.0001)和cyclin D2（r=0.657，P<0.0001）显著相关，但是与p161NK4a（r=0.103,P=-0.358）和p14ARF（r=-0.039，P=0.731）无关。在蛋白水平上，USP22与BMI-1(r=0.407,P<0.0001)、c-Myc(r=0.259,P<0.0001)、cyclin D2(r=0.430,P<0.0001)、pAkt(Ser473)(r=0.398,P<0.0001)和pAkt(Thr308)（r=0.578，P<0.0001）显著相关，但是与p16INK4a（r=-0.077，P=0.495）和p14AR（Fr=-0.187，P=0.096）无关。K聚类分析示USP22、BMI-1、c-Myc和cyclin D2的mRNA表达具有聚集现象，四者表达量的高低与结直肠癌的分期进展呈显著相关性（P=0.005）。3、通过USP22干扰技术转染至结直肠癌细胞系HCT116中，可以明显下调USP22的表达，细胞周期呈现G1期升高。通过Western blot技术检测到BMI-1、c-Myc、cyclin D2、E2F1、p53、pAkt(Ser473)和pAkt(Thr308)下调，p16INK4a和p14ARF上调。
结论：1、USP22高表达于结直肠癌中，其活化的状态参与结直肠的发生发展以及肝转移；并且检测USP22的表达可以预测患者的预后，可以作为结直肠癌的诊治靶点；2、USP22可能通过调节c-Myc的靶点cyclin D2介导BMI-1致癌通路如INK4a/ARF和Akt的活化进而促进结直肠癌的进展。