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微生物的C11α-羟基化作用是甾体转化中最重要的反应之一,可以在甾体母核的C11α位引入氧原子,具有反应条件温和、专一性强以及转化率高等优点,是甾体医药工业的关键生产技术之一。16α,17α-环氧黄体酮简称沃氏物,是一种重要的激素类药物中间体,广泛应用于激素类药物的合成,是氢化可的松等甾体激素类药物的重要原料。在半化学合成甾体药品的过程中,微生物转化11α-羟基化是最关键的步骤之一,是半化学合成的首要攻克目标。因此,本课题主要围绕微生物对16α,17α-环氧黄体酮的C11α-羟基化研究。通过对30余株真菌转化1 6α,17α-环氧黄体酮能力的筛选,获得具有转化能力的雅致小克银汉霉(Cunninghamella elegans)40250,结果显示C.elegans 40250的11α-羟基化能力较强,进而采用等离子诱变和60Coγ射线诱变的方法选育菌株。通过等离子诱变,筛选出突变株C.elegans D60-9,转化率提高了10.29%。再以此菌株为出发菌株进行60Coγ射线辐照诱变,选育出突变株C.elegans DC12-9,该菌株遗传学性质稳定,与C.elegans 40250相比生物量提高3.97g/L,转化率提高了17.36%。对筛选出的C.elegans DC12-9的培养条件进行系统研究,初步确定最佳发酵工艺条件,结果表明:葡萄糖3.3%,玉米浆2.1%,蛋白胨0.53%,(NH4)2SO4 0.3%,MnSO40.02%,BaCl2 0.03%,ZnSO4 0.01%,LiCl 0.03%,初始pH 5,接种量3%,装液量100mL/500mL,菌体培养22h,酶转化反应48h萃取后测定,其转化率达77.31%。研究C.elegans DC12-9对16α,17α-环氧黄体酮C11α-羟基化的动力学。分别考察了底物质量浓度和添加不同质量浓度的产物对羟化反应过程的影响。结果表明,较高质量浓度的底物及不同质量浓度的产物均会对羟化反应产生抑制作用,由此建立该羟化反应的动力学模型,经线性回归拟合出该反应的动力学参数。