实验利用冰冻切片技术、震荡切片技术、免疫荧光染色、明胶墨汁灌注和HE染色等方法，探究脊椎动物小鼠视觉系统中血管发育与Reelin表达的相关性及Reelin在成年鲫鱼、牛蛙、家鸽和家兔等几种脊椎动物视网膜中的表达。本研究分为两个部分：　　第一部分：脊椎动物小鼠视觉系统中血管发育与Reelin表达的相关性研究。实验目的：探究脊椎动物小鼠视觉系统中血管发育与Reelin表达的相关性。实验方法：将实验对象分成野生型和 Reeler小鼠两组。野生型小鼠取 P0（小鼠出生当天记为 P0），P3， P7，P14，P20和成年等各年龄点，分别取其视网膜、上丘、视皮层V1区进行免疫荧光染色和明胶墨汁灌注，观察血管的发育和Reelin的表达情况。对视网膜进行铺片和冰冻切片，CollagenⅣ抗体染色，观察其血管的发育情况。对上丘和皮层V1区的研究中，用明胶墨汁灌注的方法显示血管，观察该区域中血管的发育情况。对震荡切片，用GFAP抗体和Reelin抗体进行免疫荧光染色分别显示与血管发育相关的星形胶质细胞及Reelin的表达情况。Reeler小鼠取P0和成年阶段视网膜用CollagenⅣ抗体进行免疫荧光染色，观察血管的发育情况。实验结果：（1）CollagenⅣ染色显示小鼠视网膜血管是出生后开始生成，且视网膜表层血管和深层血管都是以视乳头为中心向四周进行蔓延。表层血管在P10年龄点覆盖整个视网膜，深层血管在P8时开始生长，至P14阶段铺满视网膜，小鼠视网膜血管系统发育成熟。Reeler小鼠中 P0阶段血管已经覆盖了整个视网膜，但成年小鼠视网膜中深层血管的分支与野生型相比明显减少。随着小鼠视网膜的发育， Reelin首先表达在神经节细胞和内网层，由此发出垂直分支向外网层延伸，至P14及成年，主要分布在神经节细胞层、内网层和外网层。（2）在 P0阶段，上丘部位血管主干已经生成，垂直与上丘表面的软脑膜且与软脑膜中血管相连，随着小鼠的发育上丘区血管逐渐密集。在上丘部位未见明显的Reelin阳性染色但在P0至成年阶段，GFAP在上丘带状层的有表达，大多紧贴上丘软脑膜血管。（3）在视皮层V1区P0阶段已经生成放射状主干血管，垂直于软脑膜且与软脑膜中血管相连。随着皮层发育，血管分支越来越多，密度增大。放射状星型胶质细胞多与血管伴行。在皮层发育过程中，Reelin蛋白主要表达在分子层，锥体细胞层和内颗粒层可见少量阳性染色。实验结论：在视觉系统血管发育过程中，视网膜中的血管发育与Reelin的表达在时间与空间上有一定的相关性，参与调控小鼠视网膜中血管的有序性发育，而在上丘和视皮层中的相关性不大。　　第二部分：Reelin在成年鲫鱼、牛蛙、家鸽和家兔等几种脊椎动物视网膜中的表达。实验目的：探究脊椎动物不同物种视网膜中Reelin和GFAP的表达情况。实验方法：取成年野生鲫鱼，牛蛙，家鸽和家兔视网膜，利用冰冻切片技术，进行HE染色和免疫荧光染色。实验结果：（1）Reelin在成年野生鲫鱼、牛蛙、家鸽和家兔的视网膜中均有表达。（2）GFAP在成年野生鲫鱼、牛蛙和家兔视网膜中均有表达，但在家鸽视网膜中未见明显阳性染色。实验结论：Reelin和GFAP在成年野生鲫鱼、牛蛙、家鸽和家兔的视网膜中的表达形态以及表达部位都具有差异性。