侵染兰花的两种病毒(ORSV、CyMV)的分离、检测及外壳蛋白基因克隆

来源 :中国热带农业科学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:astolzq
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分别从卡特兰、石斛兰病株中获得两种病毒分离物,通过生物学、血清学鉴定及电镜观察,鉴定其分别为齿兰环斑病毒和建兰花叶病毒.经过分离、纯化、繁殖、提纯和免疫家兔,制备了两种病毒专化抗血清,并建立了SPA-ELISA检测方法.参照文献设计DNA引物,利用纯化病毒RNA作模板,经RT-PCR扩增,得到这两种病毒外壳蛋白基因PCR片断,分别插入pBluescriptⅡSK(+)EcoRV切点上,获得ORSV和CyMV外壳蛋白基因克隆,并进行了部分DNA测序.利用pCo24和pET-21d分别构建了ORSV外壳蛋白基因的植物和大肠杆菌表达载体,并在大肠杆菌中得到正确表达.
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