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背景:慢性鼻-鼻窦炎(Chronic rhinosinusitis,CRS)人群发病率高达约8%,严重影响患者生活质量。CRS病因复杂,发病机制尚不完全清楚,是一种高度异质性的疾病,即使是相同的临床分型,内在的细胞和分子病理机制存在巨大差异,仅依靠目前分型很难达到精准治疗的目的,也难以取得满意的治疗效果,因此CRS慢性炎症如何维持的调控机制亟待研究。Th2型免疫过度活化和嗜酸性粒细胞大量浸润是CRS的重要致病因素,也是难治性CRS的特征。研究表明,器官特异性或外周血单核细胞诱导的巨噬细胞的不同分化状态(M1/M2)与免疫系统激活类型(Th1/Th2)紧密相关。Ⅲ型乙酰化酶家族成员(Sirt1-7)Sirt5在炎性疾病中,对巨噬细胞有调控作用。然而在CRS发生发展过程中,Sirt5与巨噬细胞分化与功能的关系尚未有研究报道。目的:本工作将研究CRS中Sirt5在M2型巨噬细胞活化中的作用和机制,并进一步解释其在CRS发生发展过程中的作用机制,为研究CRS潜在的药物靶点提供理论基础。方法:1.临床样本分析:探索Sirt5表达与CRS临床特征的相关性。收集临床标本;分析CRS鼻黏膜中Sirt5的表达水平及其与M2型巨噬细胞的临床评分的相关性。2.动物模型分析:1)建立小鼠CRS模型(1mg/ml OVA腹腔致敏3次,100mg/ml OVA+0.9%SEB滴鼻8周,检测鼻黏膜中Sirt5、M2型巨噬细胞含量以及Th2型细胞因子表达情况;2)行为学检测小鼠慢性鼻-鼻窦炎严重程度,在OVA+SEB诱导的CRS小鼠模型中,比较WT小鼠和Sirt5基因敲除小鼠CRS症状,小鼠鼻黏膜检测Th2型细胞因子、M2型巨噬细胞表面分子及效应分子含量与小鼠行为学表现相关性。3.细胞实验功能分析:Sirt5促进M2型巨噬细胞分化与功能的细胞学效应。该部分研究将应用小鼠来源的骨髓细胞诱导和活化M2型巨噬细胞模型(Sirt5 KO小鼠及WT小鼠来源的骨髓细胞,M-CSF培养诱导初始型巨噬细胞,IL-4或IL-13进一步活化M2型巨噬细胞),检测M2型巨噬细胞表面分子及效应分子的表达情况。证实Sirt5促进M2巨噬细胞分化与功能的细胞学效应。结果:1.与正常对照组相比,CRS患者鼻黏膜Sirt5表达量显著增高,鼻黏膜组织内Sirt5主要由M2型巨噬细胞表达。2.OVA+SEB诱导的小鼠CRS模型稳定,鼻黏膜组织Sirt5表达增高,鼻黏膜组织中Sirt5主要由M2型巨噬细胞表达,Th2型细胞因子(IL-4、IL-13)表达增高。3.Sirt5基因敲除的小鼠CRS症状明显缓解,鼻黏膜中Th2型细胞因子(IL-4、IL-13)、M2型巨噬细胞表面分子(CD206)、效应分子(Arg-1)表达水平降低。4.与WT小鼠相比,Sirt5 KO的小鼠骨髓巨噬细胞,M-CSF培养诱导初始型巨噬细胞,IL-4进一步活化M2型巨噬细胞,M2型巨噬细胞表面分子(CD206)及效应分子(TGF-β1、Arg-1)表达明显降低。结论:研究发现CRS患者和OVA+SEB诱导CRS小鼠的鼻腔黏膜内Sirt5表达显著增高,且主要由M2型巨噬细胞表达;Sirt5敲除可有效减缓CRS的发生发展,小鼠鼻黏膜组织内炎症反应减轻、上皮细胞的破坏减轻;Sirt5缺失的巨噬细胞经IL-4进一步活化为M2型巨噬细胞后,M2型巨噬细胞表面分子及效应分子明显降低;本课题研究证实Sirt5可以通过促进巨噬细胞向M2型分化加重CRS的效应;为研究CRS潜在的药物靶点提供理论基础。