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目的:本项研究聚焦于Pluranic-127修饰的新型磁性纳米Fe3O4颗粒(Fe3O4-Magnetic nanoparticles,Fe3O4-MNP)包载化疗药物柔红霉素(Daunorubicin,DNR)和化疗药物耐药逆转剂5溴-汉防己甲素(5-Bromotetrandrine,5-BrTet)在荷瘤裸鼠热疗体内逆转白血病多药耐药(MDR)的疗效的研究。 方法:实验方法分为两部分:一、药物合成,即Fe3O4-MNP及Fe3O4-MNP载柔红霉素及5溴-汉防己甲素(Fe3O4-MNP-DNR-5-BrTet)的合成;二、在体实验,包括首先构建荷瘤裸鼠模型、热疗及疗效观察。在体实验具体为1.对数生长期细胞大量培养构建荷瘤裸鼠模型;2.荷瘤裸鼠随机分为5组于外加交变磁场中治疗30分钟(Minute,min):生理盐水对照组0.2 ml/只(A组);DNR1mg/kg(B组);5-Br-Tet1mg/kg联合DNR1 mg/kg(C组);Fe3O4-MNP22mg/kg(D组);Fe3O4-MNP-DNR-5-BrTet24 mg/kg(E组);3.治疗后12天内观察裸鼠有无严重不良反应发生,观察肿瘤体积变化,12天后计算抑瘤率、取各组肿瘤行病理组织苏木精-伊红(Hematoxylin-eosin,HE)染色分析,取Fe3O4-MNP-DNR-5-BrTet组裸鼠心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏行普鲁士蓝染色考察药物体内分布状况,行蛋白印迹法(Western blot)检测各组肿瘤组织P-糖蛋白(P-gp)、bcl-2、bax及caspase-3蛋白的表达差异。 结果:制备的Fe3O4-MNP主要呈规则球形,直径13.5~23.5 nm,水溶液分散性良好;在热疗期间对肿瘤局部的升温作用有着决定性作用;热疗后Fe3O4-MNP及Fe3O4-MNP-DNR-5-BrTet组裸鼠肿瘤体积在12天内不断减小,而其它各组肿瘤体积呈现增长趋势,抑瘤率提示D组和E组对于裸鼠皮下K652/A02移植瘤有明显的抑制作用,明显优于其它各组(P<0.05);HE染色示D组和E组肿瘤组织可见明显凋亡现象;Western blot提示E组明显下调P-gp及bcl-2的表达,同时上调bax及caspase-3蛋白的表达,疗效明显均优于其它各组(P<0.05)。 结论:本课题组合成的磁性纳米药物是一种水溶性良好、载药效率较高、超顺磁性、粒径大小适中且分布均匀安全的新型药物,非常适用于动物体内治疗;动物在体实验示Fe3O4-MNP-DNR-5-Br-Tet行热疗有较强的肿瘤抑制作用和逆转耐药疗效,其在裸鼠体内热疗实验提示其具有长效的、强烈的逆转白血病多药耐药的作用;而且对预防肿瘤肝脾浸润有一定的作用;外加交变磁场作用下,升温效应明显,温度控制良好,药物聚集其逆转耐药的主要机制为下调P-gp和bcl-2的表达,上调caspase-3和bax的表达水平,促进药物在肿瘤部位聚集等。