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背景去氢骆驼蓬碱(Harmine,HM)已被证实可阻断血管生成抑制肺癌的生长;抑制乳腺癌细胞的增殖、侵袭和转移,抑制肝癌细胞的增殖并诱导其凋亡等,但目前仍未见去氢骆驼蓬碱对胃癌进展影响的相关研究。我们的前期研究发现,去氢骆驼蓬碱能够下调环氧化酶(cyclooxygenase,COX)表达从而抑制胃癌细胞增殖、转移及浸润。然而,去氢骆驼蓬碱下调COX-2表达的机制尚不清楚。目的本研究主要探讨去氢骆驼蓬碱对人胃癌细胞PTEN表达,Akt、MDM2磷酸化水平的影响,旨在明确去氢骆驼蓬碱通过下调COX-2表达从而抑制胃癌细胞增殖并促进其凋亡的机制。方法人胃腺癌细胞株SGC-7901和MKN-45常规培养于RPMI-1640培养液中,细胞长至亚单层后加去氢骆驼蓬碱(2、4、8、16、32μg/ml),分别培养24、48和72 h,MTT法检测细胞增殖;Hoechst染色观察细胞凋亡的形态变化;流式细胞仪检测细胞凋亡率;免疫印迹法检测PTEN,Akt和MDM2磷酸化水平和COX-2表达。细胞长至亚单层后分别加PTEN抑制剂bpv(Hopic),Akt抑制剂MK2206,MDM2抑制剂Nutlin-3预处理40 min后再加HM连续培养48h,Western blot检测PTEN,Akt,MDM2磷酸化水平和COX-2表达。结果去氢骆驼蓬碱可抑制SGC-7901和MKN-45细胞增殖并呈现剂量和时间依赖性;Hoechst染色显示去氢骆驼蓬碱作用于两种胃癌细胞可使其发生典型的细胞凋亡形态学改变。流式细胞仪检测结果显示去氢骆驼蓬碱剂量依赖性诱导SGC-7901和MKN-45细胞凋亡。去氢骆驼蓬碱剂量依赖性上调SGC-7901和MKN-45细胞PTEN蛋白表达,抑制Akt及MDM2磷酸化,抑制COX-2蛋白表达;PTEN抑制剂bpv(Hopic)有效抑制去氢骆驼蓬碱诱导的PTEN高表达,同时逆转去氢骆驼蓬碱抑制Akt、MDM2磷酸化和COX-2表达的作用;Akt抑制剂MK2206对PTEN表达无明显影响,联合HM可抑制Akt,MDM2磷酸化和COX-2表达且联合作用大于HM单用,MDM2抑制剂Nutlin-3对PTEN表达及Akt磷酸化无明显影响,联合HM可抑制MDM2磷酸化和COX-2表达且联合作用大于HM单用。结论HM通过PTEN/Akt/MDM2信号转导通路抑制胃癌细胞COX-2表达从而抑制胃癌的进展。