4个绵羊群体生长激素(GH)基因PCR-SSCP检测及多态性分析

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生长激素(GH)是动物体内重要的调节因子之一。本研究以小尾寒羊、德国美利奴羊、蒙古羊、德美寒杂交一代4个群体共135只绵羊作为研究对象,设计了5对引物对GH基因进行了PCR-SSCP多态性检测,并对多态性片段进行了测序,得到了如下主要研究结论:1.绵羊生长激素(GH)基因的PCR-SSCP检测结果表明,在所检测的第一内含子、第二外显子、第二内含子、第三外显子、第三内含子、第四外显子、第四内含子、第五外显子位点中,第三内含子、第四外显子检测到多态性基因,其余位点均未检测到多态性基因。2.对存在多态性的PCR-SSCP扩增产物进行测序,结果表明,引用GH-P4引物扩增的GH基因片段同时发生两个突变,一个在1257bp处发生G→A的突变,另一个在第1405bp处一个发生T→C的突变,从而引起基因突变,导致出现DNA多态性片段。3、对4个群体的绵羊引用GH-P4引物扩增的GH基因片段的基因频率及基因型频率进行分析,结果表明,各群体间基因A,B及基因型AA、AB、BB的频率在不同的群体间分布均不同:蒙古羊A、B基因频率分别为0.4858、0.5142,AA型、BB型、AB型三种基因型频率分别为0.2286、0.2571、0.5143;小尾寒羊A、B基因频率分别为0.3282、0.6719,AA型、BB型、AB型三种基因型频率分别为0.2188、0.5625、0.2188;德国美利奴羊A、B基因频率分别为0.6055、0.3950,AA型、BB型、AB型三种基因型频率分别为0.4737、0.2632、0.2636;德美寒杂交一代羊A、B基因频率分别为0.5750、0.4113,AA型、BB型、AB型三种基因型频率分别为0.4583、0.2947、0.2333。经基因型分布卡方检验结果表明小尾寒羊、德国美利奴羊、德美寒杂交一代3个群体在此多态位点处于哈代-温伯格不平衡,蒙古羊处于哈代-温伯格平衡。4、基因频率及基因型频率分析结果还表明,高产肉性能群体德国美利奴羊、德美寒杂交一代优势基因型为AA型;低产肉性能群体小尾寒羊优势基因型为BB型,此结果预示引用GH-P4引物扩增GH片段的基因型与绵羊产肉性可能存在一定的相关性。5.对4个绵羊群体引用GH-P4引物扩增片段PCR-SSCP基因型组成进行多态信息量(PIC)、纯合度(Ho)、杂合度(He)结果分析表明:蒙古羊、小尾寒羊、德国美利奴羊、德美寒杂交一代4个绵羊群体多态信息量分别为0.3748、0.3436、0.3629、0.3883,均属于中度多态性;纯合度分别为0.5004、0.5591、0.5226、0.4998,即:小尾寒羊>德国美利奴羊>蒙古羊>德美寒杂交一代;杂合度分别为0.4996、0.4409、0.4774、0.5002,即:德美寒杂交一代>蒙古羊>德国美利奴羊>小尾寒羊。
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