石斛为兰科四大属之一,具有很高的观赏价值和药用价值。建立研究石斛转化系统,对利用基因工程技术改良石斛品质具有重要的意义。FVE基因是自主开花途径中的一个关键基因,在调控植物开花过程中起着非常重要的作用。本论文以金钗石斛(Dendrobium nobil)为材料,对石斛转化系统及开花调节基因FVE功能进行了研究,得到了以下研究结果:　　 1、石斛原球茎(protocorm-like bodies,PLBs)外植体在含有2,4-D的1/2 MS培养基上预培养,可以明显提高农杆菌的侵染效果。其中,在含有2,4-D2mg/L培养基上预培养8天时,PLBs上GUS瞬时表达率达到了73.80％。在进行侵染前,将PLBs进行超声波处理也可提高瞬时表达效果。将农杆菌的侵染后的PLBs在含5mg/L Hyg的1/2 MS培养基上筛选8周后,用X-Gluc溶液染色,检测到GUS基因的表达,表明已经将外源基因转入PLBs中。　　 2、从本实验室测序的EST数据库中得到了FVE的部分序列,通过3RACE技术扩增到石斛FVE的全长序列。对FVE蛋白进行结构分析发现它具有WD40结构域,是酵母蛋白MSI和哺乳动物视网膜母细胞瘤相关蛋白RbAp46和RbAp48的一个同系物。采用RT-PCR研究了FVE在石斛中的表达情况,PLBs中未见表达,在根和茎中表达较弱,叶片和花瓣中具有较高的表达水平。低温处理(10℃)20天或30天后,FVE在花芽中的表达水平提高了。　　 3、构建了CaMV35S::FVE超表达载体,得到转基因拟南芥,转基因拟南芥比野生型略微提早开花,它的莲座叶比野生型少,根短,侧根多。通过RT-PCR分析表明:FVE下调了拟南芥中FLC的表达,而促进了SOC1和FT的表达。