新型抗葡萄膜炎制剂XZ对大鼠实验性葡萄膜炎疗效的初步观察

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目的:探讨新型抗葡萄膜炎制剂XZ对实验性自身免疫性葡萄膜炎模型大鼠的炎症抑制作用。方法:用视网膜s抗原与完全弗氏佐剂于Lewis大鼠双后足垫、双后腿及背部皮下注射,行第一次免疫,第7天同法行二次免疫,第8天以伤寒杆菌内毒素于大鼠睫状体平坦部进针行玻璃体腔注射,以建立改良EAU模型。随机分为正常组、模型组、XZ实验组(6mg/只;12mg/只)、地塞米松阳性对照组(10mg/kg),每组8只。于第9天起灌胃给药,每日1次,连续11天。隔天用裂隙灯显微镜观察EAU大鼠右眼临床表现,第10、13、16、19天采集左眼房水,ELISA检测房水IL-6、TNF-a含量。分别于高峰期恢复期即第12、20天处死大鼠,制备鼠眼HE组织切片,免疫组织化学染色法观察IFN-γ和IL-17的表达情况。结果:1.临床表现评分显示:正常组表现如常,模型组于第7天起出现明显炎症反应,第10天达到高峰,第16天开始逐步消退;XZ实验组和地塞米松组大鼠眼部炎症反应较模型组明显减轻,与模型组比较差异有统计学意义(p<0.05)。2.HE染色显示:正常组视网膜组织结构清晰,各层排列整齐,未见炎性细胞浸润。模型组在炎症高峰期出现大量炎性渗出,炎性细胞浸润广泛,视网膜各层组织结构紊乱;XZ各组和地米组大鼠视网膜各层结构稍紊乱,视网膜上少量炎性细胞浸润,炎症反应较模型组明显减轻。3.免疫组化结果显示:较正常组相比模型组在炎症高峰期可见IFN-γ和IL-17蛋白在眼内高表达,第20天IFN-γ和IL-17蛋白减少;第20天XZ各剂量组和地塞米松组相比模型组的IFN-γ和IL-17阳性细胞率显著减少(p<0.05)。4.ELISA检测房水IL-6、TNF-a含量显示:较正常组相比模型组炎症高峰期房水中TNF-a和IL-6含量显著增高,恢复期降低;XZ用药各组和地塞米松组在各时间点房水中的TNF-a和IL-6含量均明显低于模型组(p<0.05)。结论:应用视网膜s抗原联合伤寒杆菌内毒素免疫Lewis大鼠,可成功地建立Lewis大鼠葡萄膜炎模型。新型抗葡萄膜制剂XZ能有效减轻EAU大鼠葡萄膜炎症,可能通过减轻Th1细胞和Th17细胞免疫反应发挥对实验性葡萄膜炎的治疗作用。
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