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脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)是镰刀菌产生的一种真菌毒素，广泛存在于世界各地的谷物，特别是小麦中。由于DON能引起动物及人的多种中毒反应，因此对食物中的DON进行快速检测显得非常重要和迫切。本论文对DON的快速检测进行了研究，包括DON的结构修饰、抗体制备和ELISA方法的建立，结果如下： 1、采用保护-去保护策略使DON的3位C上的羟基与琥珀酸酐反应，使DON衍生后获得一个羧基。利用薄层色谱法跟踪反应进程。采用制备薄层色谱法纯化Rf为0.53的反应产物(DON的Rf为0.66)，纯化产物利用高效液相色谱分析，最后采用电喷雾离子化质谱(ESI-MS)分析产物的分子量，其[M-H~+]为395.1，与3-HS-DON的分子量相同，因此确认衍生产物是3-HS-DON。采用碳化二亚胺法偶联3-HS-DON与载体蛋白BSA和OVA，偶联产物利用快速蛋白液相层析系统(FPLC)进行分析。 2、用3-HS-DON-BSA作免疫原，免疫Balb/c小鼠和豚鼠。经过间接ELISA法检测，豚鼠血清的效价为1：6400，小鼠混合血清的效价为1：12800。选取小鼠血清进行交叉反应、回收率等试验。 3、测定了所得抗体与单端孢霉烯族类其它毒素的交叉反应。引起抗DON抗体最大结合50％抑制时，所需DON及其类似物3-Ac-DON和T-2毒素的量分别为：63μg/mL、114μg/mL和＞1000μg/mL；相对交叉反应率分别为：100％，55.2％，＜6.3％。 4、取未免疫的小鼠血清作阴性对照，将免疫的Balb/c小鼠血清进行倍比稀释，对不同浓度的包被抗原进行间接ELISA试验。结果表明，包被抗原的最适工作浓度为1/1500，小鼠血清工作浓度为1/1600。 5、在包被原和抗体的最适工作浓度下，测定了有机溶剂甲醇对DON免疫分析的影响。甲醇浓度在10％以下时，对DON免疫分析的影响很小，浓度在15％以上时，会有显著的影响，浓度越高，影响越大。 6、在10％甲醇浓度下，间接竞争ELISA对DON的检测范围为0.1-100μg/mL，检出限为0.1μg/mL。平均回收率为82％-93％，精密度(CV％)为4.65％-21.3％。脱级雪腐镰刀菌烯醉(DON)人工抗原的合成及其酶免疫检测方法的建立 7、应用本文建立的方法，对2002年人工病圃的小麦赤霉病样种子进行了DON含量测定，4个样品中均检测到了高浓度的DON.