外源性环核苷酸对动物脂肪代谢的影响

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本研究以哈白兔为实验动物,采用同位素示踪技术和放射免疫技术,运用房室分析经典理论方法,研究同位素标记脂肪代谢的中间产物甘油在哈白兔体内的吸收、分布、转化、代谢和排出的动态变化规律,探讨了脂肪在动物体内的生物转化过程。进而通过注射外源性CNT研究脂肪代谢过程中,外源性CNT对动物血液的主要生理生化指标、内源性CNT含量及瘦素的影响,探索外源性CNT对动物体内脂肪代谢的调控机理,为控制动物脂肪代谢提供依据。研究结果如下:1.甘油在动物体内的代谢可用一级吸收二室模型来描述,本研究对一般的二室模型进行了改良,并拟合出了最佳动力学方程。其决定系数R2=0.9876;3H-Glycerol在动物体内的分布速率常数(α)为0.1010 h-1,分布半衰期(T1/2α)为6.8627 h;消除速率常数(β)为0.0722 h-1,消除半衰期(T1/2β)为9.6009 h;在中央室的吸收速率常数(γ)为0.1007 h-1,吸收的半衰期(T1/2γ)为6.8814 h;在周边室的吸收速率常数(δ)为0.1708 h-1,吸收的半衰期(T1/2δ)为4.0594 h,于(Tmax)5.4704 h达到峰浓度(Ymax)17.8602 Bq/mL,曲线下面积(AUC)为988.5864Bq·h/mL。但注射了cGMP后,拟合的示踪动力学模型方程决定系数R2=0.7173,注射了cAMP后的动力学方程决定系数R2=0.3064,混合注射cGMP和cAMP后的动力学方程决定系数R2=0.7511,三者的预测值和实测值差异显著,不能用来描述3H-Glycerol的代谢规律。2.外源性cGMP对甘油在体内代谢的影响不大,符合正常状态下甘油的代谢规律;注射外源性cAMP后21~65h对甘油在体内的代谢影响非常明显,3H-Glycerol含量高于正常生理状态,使甘油的代谢规律发生了明显的变化;外源性cGMP和cAMP的混合作用使甘油的代谢发生了显著的变化,使3H-Glycerol含量显著低于正常生理状态。充分说明了外源性cAMP对脂肪的动员有明显作用,而cGMP对脂肪的合成有较小作用。3.外源性甘油在转运过程中除一部分随代谢排出体外,其余多数参与了甘油三脂的合成而沉积于肾脏、肠、脂肪、肝脏、脑等组织或器官中。正常生理状态下3H-Glycerol在各个组织或器官的分布趋势为:肾>肠>脂肪>肝脏>脑>膀胱>胃>肌肉>心脏>生殖器>肺脏>脾脏。但是,注射了cGMP会引起脂肪多积累于肺脏和脾脏,而在胃内的积累较少。注射了cAMP会引起脂肪在脾脏和肺脏积累较多,而在肝脏、胃和脑中的积累较少。cGMP和cAMP的混合注射会引起脂肪在生殖器、肺脏、脾脏的积累较多,而在脑、肌肉、肠的积累明显较少。4.经测定,动物体内血液内源性cGMP浓度为22.72 pmol/mL,cAMP浓度为88.84 pmol/mL,cAMP/cGMP为3.91;外源性CNT能有效提高内源CNT水平,单独注射外源性cGMP可使内源性cGMP和cAMP分别增加7.40pmol/mL和17.20pmol/mL,增加幅度分别为32.54%和19.36%;单独注射cAMP可使内源性cGMP和cAMP分别增加3.05pmol/mL和34.50pmol/mL,增加幅度分别为13.41%和38.84%;混合注射1:1的cGMP和cAMP可使内源性cGMP和cAMP分别增加4.42pmol/mL和22.79pmol/mL,增加幅度分别为19.42%和25.66%。而且无论单独注射还是混合注射cAMP总有优于cGMP6%的优势。另外,可以得知单独注射cGMP可以明显提高内源性cGMP的水平,而且在注射后45h以内效果最佳;单独注射cAMP可以明显提高内源性cAMP的水平,而且在4d或者更长时间会持续有效;肯定了外源性CNT的作用,尤其是cAMP的作用,为研究CNT对脂肪代谢的影响奠定了坚实的基础。5.经测定,动物体内血液瘦素浓度为9.10 ng/mL,通过cGMP、cAMP和1:1的cGMP+cAMP处理后浓度分别为9.34ng/mL、7.88ng/mL和8.48ng/mL,变化率为2.64%、-13.36%和-6.77%。cGMP对血液Leptin水平有较小的正调控作用,cAMP对血液Leptin水平有负调控作用,而且cAMP的作用比较明显。注射cAMP后65h以内,Leptin含量明显降低,以调节脂肪代谢,促进脂肪分解为游离脂肪酸,以后趋于正常。注射cGMP对Leptin的影响不大。6.正常状态下,动物血脂平均含量为1072 mg/100mL,单独cGMP处理后血脂含量大幅度增加,平均增加了17.63%,而经过cAMP处理后的血脂含量有较小幅度的减小。正常状态下,动物血糖平均含量为80.11mg/100mL,单独cAMP处理后血糖含量平均仅有1.79%的增加,而经过cGMP处理后的血糖含量增加率超过了10%。正常状态下,动物血蛋白平均含量为8.37g/100mL,经过cGMP,cAMP和混合处理后血蛋白平均增加率大约为5%左右。cGMP对促进血脂的合成代谢有明显作用,通过注射cGMP在10h内对血脂没有影响,10~21h对血脂的合成有显著促进作用,21h后血脂才保持一定增加的幅度。而cAMP对降解有较小作用,通过注射cAMP在45h以内对血脂有降解作用,而45~65h又转为合成作用,65h以后作用消失。注射CNT对血糖、血蛋白的作用都不明显,但注射CNT6~21h时,促进了体内脂肪发生分解,引起糖异生而导致血糖含量的增加。
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