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褐飞虱Nilaparvata lugens (Stal) (Hemiptera:Delphacidae)属同翅目,飞虱科;二化螟Chilo suppressalis (Lepidoptera:Pyralidae)属鳞翅目,夜蛾科,同为水稻上的重要害虫。近年来,新型嗯二唑类杀虫剂茚虫威在生产中广泛使用防治水稻等作物的鳞翅目害虫(如二化螟、三化螟、稻纵卷叶螟)等。前期的研究表明亚致死剂量的茚虫威抑制了褐飞虱生殖。而昆虫的生殖主要受卵黄蛋白的卵黄蛋白原调节,而保幼激素调控卵黄蛋白合成。保幼激素酯酶属羧酸酯酶家族,水解保幼激素为无生物活性的保幼激素酸。本文研究了亚致死剂量茚虫威对褐飞虱和二化螟保幼激素Ⅲ含量及保幼激素酯酶基因mRNA相对表达水平的影响,进一步揭示茚虫威抑制生殖的机理,比较研究其对同一生境下的靶标与非靶标害虫的亚致死生殖效应,对害虫综合治理及茚虫威的药效评价和合理使用具有重要的指导意义。实验结果表明如下:1.茚虫威亚致死剂量处理褐飞虱,雌虫保幼激素Ⅲ含量和保幼激素酯酶基因Nljhe mRNA表达量的影响茚虫威处理的褐飞虱交配前后1,3和5 d雌虫体内保幼激素Ⅲ含量均随杀虫剂浓度的增加而显著降低。交配前1,3和5d保幼激素Ⅲ含量的平均值分别比对照降低了32.2%,31.7%和44.5%;交配后1,3和5d保幼激素Ⅲ含量的平均值与对照相比,降低了42.8%,52.3%和46.4%。此外,茚虫威处理的褐飞虱交配后雌虫保幼激素Ⅲ含量显著高于交配前,表明交配促进了雌虫保幼激素Ⅲ的合成。随着茚虫威浓度的增加褐飞虱雌虫Nljhe基因mRNA的表达水平升高。茚虫威浓度与交配前、后褐飞虱雌虫Nljhe基因mRNA的表达水平呈线性相关,特别是交配前和交配后3 d。交配前1、3和5 d褐飞虱雌虫Nljhe基因mRNA的表达水平的平均值分别是对照的4.8、5.0和4.4倍,交配后1,3和5 d Nljhe基因mRNA的表达水平的平均值分别是对照的6.5、7.6和5.3倍。茚虫威处理显著诱导交配前后褐飞虱雌成虫Nljhe基因mRNA的表达水平。此外,交配后1、3、5 d的Nljhe基因mRNA的相对表达水平分别高于交配前1、3、5 d,表明交配诱导褐飞虱雌虫Nljhe基因mRNA的表达。2.茚虫威亚致死剂量处理二化螟幼虫保幼激素Ⅲ含量和保幼激素酯酶基因Csjhe mRNA表达量的影响通过反转录多聚酶链式反应技术(RT-PCR)克隆了二化螟保幼激素酯酶基因cDNA片段,长为1292bp.与家蚕Bombyx mori (Lepidoptera:BombMsidae)、粘虫(Mythimna separata) (Lepidoptera:Noctuidae)和云杉卷叶蛾Choristoneura fumiferana (Lepidoptera:Tortricidae)的JHE相似度较高,分别为78%、74%、71%。处理3d后的4龄幼虫体内的保幼激素Ⅲ的含量随茚虫威浓度的增加而显著降低。与对照相比,0.8、0.4、0.2、0.1g/L茚虫威处理二化螟3龄幼虫3d后,保幼激素Ⅲ含量分别降低了37.7%、32.0%、22.3%和11.0%,说明茚虫威抑制了保幼激素的合成。处理6d后的5龄幼虫体内的保幼激素Ⅲ含量无显著差异,但与处理3d后的4龄幼虫相比,除0.8g/L处理外,其体内保幼激素Ⅲ的平均含量均低于处理3d后的幼虫,说明二化螟末2龄幼虫体内的保幼激素滴度开始下降。与对照相比,除0.1g/L茚虫威处理外,4龄幼虫保幼激素酯酶基因Csjhe mRNA的相对表达量随杀虫剂浓度的升高而显著升高。0.2、0.4、0.8 g/L的茚虫威处理后,二化螟4龄幼虫的Csjhe mRNA的相对表达量分别是对照的1.38、1.92、5.25倍。0.1、0.2g/L的茚虫威处理后,二化螟5龄幼虫体内的Csjhe mRNA的相对表达量分别是对照的1.46和1.87倍,但其他浓度处理后,5龄幼虫体内的Csjhe mRNA的相对表达量反而下降。3.茚虫威亚致死剂量处理对褐飞虱雌虫和二化螟幼虫保幼激素Ⅲ含量和保幼激素醑酶基因影响的比较茚虫威亚致死剂量对褐飞虱雌虫交配前后体内保幼激素含量及保幼激素酯酶基因Nljhe相对表达量的变化,与茚虫威不同浓度处理的二化螟的4龄幼虫体内保幼激素含量及保幼激素酯酶基因Csjhe基因mRNA表达的变化一致。表明茚虫威抑制保幼激素的合成,诱导JHE基因mRNA的表达。本文通过比较研究,表明茚虫威通过抑制JH的合成调控褐飞虱和二化螟的生殖,而且表明茚虫威适用于水稻田问害虫防治。