脱落酸对番茄防御灰叶斑病的功能研究

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番茄(Solanum lycopersicum)不仅是重要的经济作物,也是植物抗病机理研究的经典模式作物。目前已知200多种病害能够危害番茄,它们严重破坏番茄生产。除了主要病害的威胁,非主流病害近年来逐渐爆发,对番茄作物产生了严重危害。然而,由于缺乏抗病种质,抗病机理不清楚,未来这些病害将会造成难以估计的损失。灰叶斑病(Grey leaf spot disease)是近年来在世界范围内爆发的一种可侵染多种作物的真菌性病害。番茄是灰叶斑病的重要危害作物,严重时可以造成高达80%的番茄产量损失,目前在我国的多个蔬菜基地已经爆发灰叶斑病。由于缺乏抗灰叶斑病的种质,灰叶斑病的发病机制和宿主抗病机理不明确,目前无有效防治措施。因此筛选抗病种质资源,解析植物防御灰叶斑病的机理是迫切的产业需求和重要科学问题。前期我们从番茄病残体中,分离纯化了番茄灰叶斑病的病原——番茄匍柄霉菌(Stemphylium lycopersici),并建立了成熟的人工接种侵染体系。在此基础上,本研究以番茄为模式作物,定位于筛选新的抗病种质,并初步解析植物防御灰叶斑病的分子基础。首先,通过对实验室收集的番茄种质资源进行灰叶斑抗病筛选,结果表明不同番茄材料对灰叶斑病的侵染有不同的抗病表型。其中我们发现,脱落酸(ABA)合成缺失突变体sitiens能够高度防御灰叶斑病。其次,本研究探索了sitiens突变体抗病的分子机理。通过研究发现,灰叶斑病原菌侵染sitiens突变体叶片后,在被侵染部位相对于易感灰叶斑病的野生型番茄(WT)更早且大量合成H2O2。而外施ABA处理sitiens突变体后,突变体的病斑大小以及被侵染部位由病原诱导的H2O2产生量均恢复到WT水平,其H2O2合成提前的表型也消失。这表明ABA的合成缺陷导致了番茄植株抗病表型。最后,我们用生物信息学方法,对番茄脱落酸合成通路相关基因查找预测,并绘制了番茄中的脱落酸合成通路图。通过荧光实时定量PCR方法,我们检测了病原侵染后番茄ABA合成相关基因的表达。发现在灰叶斑病原侵染后,ABA合成酶基因受到病原的诱导。这些研究结果表明,ABA通过调控H2O2水平控制植物对灰叶斑病的抗性。在这些研究基础上,我们未来将通过基因转化,改变番茄中ABA的合成量并创制新的抗灰叶斑病的种质资源。综上所述,番茄植株对灰叶斑病的抗性与体内的ABA含量水平密切相关。降低ABA含量导致了番茄对灰叶斑病获得抗性,并且这种抗病能力与侵染部位早期的H2O2积累密切相关。这项研究表明,通过人工改变植物体内的ABA含量可以增强植物防御灰叶斑病的能力,这为抗病种质的创制和抗病机理的解析提供了重要的线索。
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