背景：心肌梗死(myocardial infarction, MI)是临床常见的心血管系统疾病,是冠心病的危重类型,死亡率高。心肌坏死后将进一步引起心脏重构,导致心律失常和心力衰竭。心脏重构包括心室重构、血管重构、神经重构及电重构,临床表现为：心肌质量、心腔容量及形态结构的改变,心脏负荷增加,顺应性降低,内膜下心肌灌注减少,心肌耗氧量增加,代偿机制启动障碍,心肌电-机械失同步。形态学上表现为：心肌细胞肥大、心肌细胞凋亡、间质纤维母细胞增生及间质纤维化。上述一系列表现造成心功能的进行性下降,增加心律失常的发生,最终导致心力衰竭。有效的控制心肌梗死后心脏重构对改善患者预后有重要的意义。Ghrelin是从胃中分离出来的体内生长激素释放肽受体的天然配体,含有28个氨基酸残基,除了增加食欲,促进生长激素释放外,研究发现其还具有多重心血管保护作用,如抗炎,舒血管效应,抑制RAS系统的活性,减轻心脏缺血／再灌注损伤,调节心肌细胞能量代谢等。本文拟探讨Gherlin在MI后心脏重构中的作用,研究分为以下二个部分。第一部分：心肌梗死后Ghrelin浓度及其受体的动态变化目的：观察心肌梗死后Ghrelin血浆浓度及其受体的动态变化。方法：30只SD大鼠被随机分成正常对照组(n=6只),假手术组(n=6只),心肌梗死组((?)18只)。通过结扎冠状动脉制作MI模型,对照组开胸后在冠状动脉下穿线,但不结扎。心梗组分别于梗死后3天、7天和28天取材,每个时间点各6只大鼠,对照组随时取材,分别收集血样、梗死区和梗死边缘区心肌组织,采用ELISA方法检测血浆Ghrelin水平,RT-PCR方法和免疫荧光技术检测心肌梗死区及周边区Ghrelin和GHSR-la mRNA表达。结果：与正常对照组、假手术组比较,MI后3天、7天和28天血浆Ghrelin浓度呈动态降低过程,28天组Ghrelin浓度最低(0.42±0.05nl/ml,P<0.05)。而假手术组与正常对照组比较,血浆Ghrelin浓度无明显差异(P>0.05)。与对照组、假手术组比较,MT后3天、7天和28天梗死区域和梗死周边区域心肌中Ghrelin mRNA表达降低(P<0.05),并且随着梗死时间的延长,其表达量逐渐降低(P<0.05)；但对照组与假手术组之间比较无差异(P>0.05)。与对照组、假手术组相比,MI后3天、7天至28天梗死区域和梗死周边区域心肌中GHSR-la mRNA表达升高(P<0.05),随着梗死时间的延长,其表达量逐渐升高(P<0.05)。免疫荧光检测方面,假手术组与梗死3天组无明显统计学差异(P>0.05),与假手术组比较,梗死7天和梗死28天组心肌Ghrelin表达显著降低(P<0.01)；与假手术组相比,心肌梗死后3天GHSR-la表达显著升高,具有显著差异(P<0.01),随着梗死时间延长,GHSR-lA表达渐降低,但仍高于假手术组(P<0.05)。结论：MI后Ghrelin血浆浓度及其受体的表达发生了动态的变化,这一改变可能与MI后期心功能的进行性变化相关。第二部分：Ghrelin对大鼠心肌梗死后电重构的影响及机制研究目的：观察Ghrelin对大鼠心肌梗死后电重构中的作用。方法：将65只SD大鼠随机分成假手术组(n=15)和心肌梗死组(n=50)。假手术组开胸后剪开心包腔,不结扎冠状动脉。心肌梗死组大鼠结扎冠状动脉前降支制作心梗模型。存活7天的34只大鼠随机分成Ghrelin干预组(n=17)和梗死对照组(n=17)。Ghrelin干预组按Ghrelin100μg/kg的剂量皮下注射,2次/日。梗死对照组和假手术组皮下注射等量生理盐水。28天后采用程控刺激进行在体电生理测定,采用免疫组化方法检测隙连接蛋白43(Cx43)的分布,免疫印迹法检测Cx43蛋白表达,实时定量PCR法检测Cx43mRNA表达。结果：与梗死对照组相比,Ghrelin能显著降低室性心动过速的诱发率(P<0.05),心律失常评分也显著降低(P<0.05)。与假手术组相比,梗死心肌内Cx43表达显著降低(P<0.05),Ghrelin干预使梗死周边心肌Cx43蛋白表达及其mRNA水平增加(P<0.05)。结论：Ghrelin能改善心肌梗死后大鼠心脏的电生理学特性,增加心肌Cx43的表达,防止室性心律失常的发生,对心血管系统具有保护作用。第三部分：Ghrelin对大鼠心肌梗死后血管重构的影响及机制研究目的：研究Ghrelin在MI后大鼠心肌血管重构中的作用及其可能的机制。方法：雄性SD大鼠65只,随机分为假手术组(n=15),心梗对照组(n=25),ghrelin干预组(n=25)。假手术组开胸后剪开心包腔,不结扎冠状动脉。心肌梗死组大鼠结扎冠状动脉前降支制作心梗模型。Ghrelin治疗组大鼠皮下注射Ghrelin,2次／日,剂量为100μg/kg,心梗对照组皮下注射等量的生理盐水。4周后采用RT-PCR方法检测各组动物血管内皮生长因子(VEGF) mRNA表达,Western-blot方法检测VEGF、Bcl-2和Bax蛋白的表达,免疫组化方法分析新生血管的密度。结果：与梗死对照组相比,Ghrelin显著增加梗死区及梗死周围区域α-SMA阳性血管密度(P<0.01)和VEGF的表达(P<0.01)。与假手术组比较,Ghrelin治疗组和心梗对照组Bcl-2表达降低(P<0.01),心梗对照组Bax蛋白的表达增高(P<0.01)。与心梗对照组比较,Ghrelin治疗组Bcl-2表达增高,而Bax蛋白的表达降低(P<0.01)。结论：Ghrelin可通过增加的VEGF表达和抗凋亡效应促进血管生成,从而改善心功能、防止心脏重塑。Ghrelin可望作为心梗后抑制左室重塑一种新的对策。