实验目的:观察腺苷A1受体基因敲除小鼠在戊四氮致痫后大脑皮层蛋白质的变化,探讨腺苷A1受体的抗癫痫和脑保护作用机制。实验方法:实验首先采用PCR技术鉴定腺苷A1受体基因敲除小鼠与野生型小鼠,点燃组应用戊四氮(30mg/kg)腹腔注射制作癫痫模型,腺苷A1受体基因敲除小鼠和野生型小鼠均设立对照组,对照组小鼠采用腹腔注射等量生理盐水,癫痫模型点燃成功后24h、1m断头分离大脑皮层,提取总蛋白,利用蛋白组学双向电泳(two-dimensional electrophoresis, 2-DE)检测癫痫发作后大脑皮层内蛋白质表达的变化,运用2-DE图像扫描系统扫描电泳凝胶,使用Image Master 2Dplatinum5.0图像分析软件对2-DE图像进行组内、组间比较,表达差异大于两倍及以上者为具有意义的差异点,选取点燃组其中部分差异点进行质谱分析。研究结果:1.点燃组癫痫模型点燃成功后24h,1m,分别与对照组小鼠相比,大脑皮层内多种蛋白质表达具有显著性差异。2.腺苷A1受体基因敲除小鼠与野生型小鼠相比较,对照组两者之间大脑皮层内蛋白质表达无显著性差异,点燃组两者之间多种蛋白质表达具有显著性差异。3.癫痫模型点燃成功后腺苷A1受体基因敲除小鼠与野生型小鼠相比,大脑皮层内表达下调或无表达的蛋白为谷氨酰胺合成酶、醛缩酶A及甘氨酸受体;表达上调的蛋白为蛋白激酶C及3-磷酸甘油醛脱氢酶。结论腺苷A1受体可能通过改变大脑皮层内多种蛋白质表达发挥其抗癫痫和脑保护作用。