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脱氧雪腐镰刀菌烯醇毒素(DON毒素)在自然界中存在广泛,由真菌产生。主要污染谷物、食品、饲料等,对人类的危害十分严重。因此,建立一种快速、灵敏的检测方法检测毒素的含量是非常有必要的。喹烯酮虽然属高效、安全的饲料添加剂,但该药物作为兽药使用,仍需考虑其通过食物链作用对人体可能会产生不良影响,所以也需要建立其食用动物组织残留量检测方法并进一步确定其残留限量。脱二氧喹烯酮(Desoxyquinocetone, DQCT)是喹烯酮在动物体内的主要代谢产物。本研究是将脱二氧喹烯酮作为喹烯酮的残留标志物进行药物的残留研究。本论文旨在建立检测脱氧雪腐镰刀菌烯醇和脱二氧喹烯酮的酶联免疫吸附(ELISA)检测方法。本论文利用碳二亚胺(CDI)法合成了DON毒素的免疫原DON-MBSA,采用4-二甲氨基吡啶(DMAP)催化法,成功将DON的三个羟基位点乙酰化,与载体蛋白钥孔血蓝蛋白(KLH)偶联,合成了包被原DON-HS-KLH。免疫小鼠后获得了多克隆抗体,建立了DON毒素的间接竞争ELISA方法。该方法的IC50为1.05μg/mL,线性范围为0.01μg/mL-100μg/mL。本实验是在本实验室原来合成人工抗原的基础上,改变了免疫原的合成方法,使抑制实验得到较好改善。本论文采用混合酸酐法和碳二亚胺法成功合成了喹烯酮残留标志物脱二氧喹烯酮的免疫原DQCT-MBSA和包被原DQCT-OVA。用过碘酸钠氧化法将DQCT-OVA与辣根过氧化物酶(HRP)偶联,合成了酶标抗原DQCT-OVA-HRP。用DQCT-BSA免疫小鼠后获得了高效价的多克隆抗体,取脾细胞与SP2/0鼠骨髓瘤细胞融合,经四次筛选和克隆,得到了2株能稳定分泌抗DQCT抗体的单克隆细胞株(1A6,9E10),并制备单克隆抗体腹水,将腹水用辛酸-饱和硫酸铵法进行纯化。经检测,1A6、9E10的抗体类型均为IgG2a,其轻链为K链。腹水效价为1:128000。建立了DQCT的直接竞争ELISA检测方法,该方法的IC50为38.02以IC20-IC80作为检测范围,检测范围为1.9μg/mL-776.2μg/mL。