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目的:研究虫草素在胆囊癌细胞中的生物学功能;筛选虫草素在胆囊癌细胞中的作用靶点;探讨该作用靶点在胆囊癌组织和细胞的表达及生物学功能和机制。方法:通过CCK8实验初步验证虫草素是否有抑制胆囊细胞的作用并筛选药物浓度。通过增殖、克隆形成、凋亡、周期分布、线粒体膜电位检测等实验检测虫草素对胆囊癌细胞GBC-SD和NOZ的生物学功能影响;通过Westernblot实验检测相关蛋白的变化,初步探讨虫草素的作用机制;通过裸小鼠皮下瘤模型检测虫草素体内对胆囊癌细胞生物学行为的影响。再通过基因芯片筛选虫草素作用前后胆囊癌细胞基因差异表达,筛选虫草素的作用靶点,免疫组织化学染色、qRT-PCR实验验证该靶点在胆囊癌组织和细胞中表达水平。通过siRNA干扰该靶基因,CCK-8增殖实验、克隆形成、划痕愈合、Transwell小室侵袭、裸小鼠皮下成瘤能力、Westernblot实验来检测该靶点体内、外兑胆囊癌细胞的生物学功能的影响及可能的信号通路。并过表达该基因,探讨是否可阻断或者削弱虫草素对胆囊癌细胞生物学行为的影响。结果:虫草组的最佳作用浓度为GBC-SD细胞:0,100,200,400,80μg/ml;NOZ细胞:0,10,20,40,60μg/ml。以上浓度作用后,胆囊癌细胞增殖、克隆形成能力明显下降,凋亡细胞数量显著增加,周期分布S期细胞数明显增多,线粒体膜电位显著下降,凋亡和周期蛋白发生异常,NOZ细胞体内成瘤能力明显下降。基因芯片筛选显示LASP-1可能是虫草素作用靶点之一,该基因在胆囊癌组织和细胞中高表达,敲减该基因后,胆囊癌细胞增殖、侵袭和迁移能力明显下降,体内成瘤能力明显下降,western blot提示PI3K、Akt通路蛋白表达降低。过表达该基因后,可以削弱虫草素抑制胆囊癌细胞的增殖能力。结论:虫草素可以通过抑制LASP-1基因的表达,而起到抑制胆囊癌细胞的增殖和侵袭能力;虫草素可能不只通过单一作用靶点来抑制胆囊癌细胞的发展,其在肿瘤中的作用可能是多靶点、多效应、多途径的方式。