背景各种心血管疾病的终末期表现是心力衰竭,发病率高,死亡率高。因此,关于慢性心力衰竭（Chronic Heart Failure,CHF）的发病机制的研究对探索其治疗手段至关重要。刺梨黄酮（Flavone of Rasa Raxburghii Tustt,FRRT）具有保护心肌细胞、下调离体心肌细胞凋亡的作用。Integrinβ₁和FAK是整合素信号通路中的关键蛋白,负责心肌组织中心肌细胞与细胞外基质间信号转导。本研究采取制备CHF动物模型并使用刺梨黄酮干预来探讨Integrinβ₁、FAK和凋亡相关蛋白（BAX、Bcl-2、p53）的变化以及两者的关系。目的探讨FRRT干预CHF大鼠慢性心力衰竭症状过程中,Integrinβ₁、FAK、BAX、Bcl-2和p53表达的变化以及发挥的作用。材料和方法由新乡医学院实验动物中心提供的体重（180±20）g雄性SD大鼠,适应性饲养后随机分为3组:空白对照组（n=10,腹膜内注射生理盐水以及灌胃超纯水）、CHF组（n=10,腹膜内注射阿霉素溶液以及灌胃超纯水）、FRRT干预组（n=20,腹膜内注射阿霉素溶液以及灌胃FRRT溶液）。应用的阿霉素浓度为1mg/1ml,剂量为2mg/kg。超声心动图结果分析确定大鼠CHF模型制备成功,应用的FRRT为新乡医学院药学院供应（专利号ZL201010570876.1）,浓度为20mg/ml的FRRT溶液分为两种剂量,按照大鼠的体重分为高剂量（60mg/kg）和低剂量（30mg/kg）组。灌胃完成后应用小动物超声成像系统对大鼠的心功能进行评价。检测后处死大鼠取材、制作标本。处死大鼠开胸取出心脏,使用眼科剪分离并取心室肌组织,分别用于光镜观察、Western Blot取材。使用免疫组织化学（Immunohistochemistry,IHC）染色和Western Blot技术检测Integrinβ₁、粘着斑激酶（Focal Adhesion Kinase,FAK）和凋亡相关蛋白（Bax、p53和Bcl-2）的分布和表达,并应用Image J及GrapfPad Prism 5软件对IHC染色和Western Blot的结果进行分析和半定量检测。本研究所采用的统计学分析软件为SPSS 19.0。以均数±标准差（x±s）表示,多组间比较采取单因素方差法检验分析,两组资料均数之间用独立样本t检验分析,P<0.05为差异有统计学意义。结果1.慢性心力衰竭大鼠模型评价小动物超声成像系统检测和肢体导联心电图（Electrocardiograph,ECG）结果分析统计显示:与对照组比较,CHF组大鼠的左心室射血分数（LvEF）和左心室短轴缩短率（LvFS）均明显下降（P<0.05）,收缩末期左心室容积（LvESV）明显上升（P<0.05）。与对照组比较,CHF组大鼠ECG表现为心率加快,ST段抬高;FRRT组大鼠心率增高低于CHF组,ST段无明显改变。FRRT干预后对模型对照组、FRRT组（高剂量干预组、低剂量干预组）的大鼠再次进行心功能检测。数据统计分析结果显示:与模型对照组比较,低浓度FRRT干预组和高浓度FRRT干预组LvEF和LvFS均明显上升（P<0.05）。低浓度FRRT干预组和高浓度FRRT组LvESV均明显下降（P<0.05）,t检验结果显示组间差异无统计学意义（P>0.05）。以上结果证实大鼠CHF模型制备成功,FRRT干预有效。2.形态学观察2.1光镜观察HE染色显示对照组大鼠心肌细胞完整,排列整齐,细胞间隙均匀,未见异常改变。CHF组大鼠,心肌结缔组织间隙明显增宽,某些区域存在心肌细胞水肿、肌纤维溶解和炎性细胞浸润,部分毛细血管扩张。FRRT组大鼠心肌纤维排列稍紊乱,肌纤维溶解不明显。2.2电镜观察对照组大鼠心室肌原纤维规则整齐,肌节整齐,线粒体排列规则,胞核规则。模型组大鼠心室肌纤维肌丝排列紊乱,出现明显的收缩带,发生退行性改变;细胞核发生棘突样改变,线粒体排列紊乱。FRRT干预后,心室肌丝排列稍紊乱,肌节收缩现象减弱,与对照组相比仍存在收缩带。线粒体排列稍紊乱。3免疫组织化学检测3.1凋亡相关蛋白表达情况p53阳性表达标志为棕黄色点状表达。与对照组比较,CHF组大鼠心肌组织细胞p53蛋白阳性表达增强（P<0.05）,FRRT组大鼠心肌组织细胞p53蛋白阳性表达低于CHF组和对照组（P<0.05）。BAX阳性表达标志为棕黄色点状表达。与对照组比较,CHF组、FRRT组大鼠心肌组织BAX蛋白阳性表达增加（P<0.05）,FRRT组大鼠心肌组织BAX蛋白阳性表达低于CHF组（P<0.05）。Bcl-2阳性表达标志为棕黄色点状表达。与对照组比较,CHF组、FRRT组大鼠心肌组织Bcl-2蛋白阳性表达减弱（P<0.05）,FRRT组大鼠心肌组织细胞BAX蛋白阳性表达高于CHF组（P<0.05）。3.2 Integrinβ₁信号通路相关蛋白表达情况Integrinβ₁阳性表达标志为棕黄色线样结构。与对照组比较,CHF组大鼠心肌组织Integrinβ₁蛋白阳性表达增强（P<0.05）,FRRT组大鼠心肌组织Integrinβ₁蛋白阳性表达低于CHF组和对照组（P<0.05）。FAK阳性表达标志为棕黄色线样及点状结构。与对照组比较,CHF组、FRRT组大鼠心肌组织FAK蛋白阳性表达增强（P<0.05）,FRRT组大鼠心肌组织FAK蛋白阳性表达低于CHF组（P<0.05）。4.Western BoltWestern Blot和半定量检测结果分析显示,与对照组比较,CHF组大鼠心肌组织p53表达增加量增加（P<0.05）,FRRT干预组p53蛋白表达量低于CHF组和对照组（P<0.05）。CHF组BAX表达量较对照组增加（P<0.05）,FRRT组与CHF组相比,差异明显且低于CHF组（P<0.05）。与对照组比较CHF组Bcl-2表达量明显减少（P<0.05）,FRRT干预组比CHF组表达增加（P<0.05）,但与对照组比较表达减少。与对照组比较,CHF组Integrinβ₁表达量与对照组相比增加,FRRT组表达减少（P<0.05）。与对照组比较,CHF组FAK表达量增加（P<0.05）,FRRT干预组与对照组相比表达量下降（P<0.05）。结论刺梨黄酮能通过调节CHF大鼠心肌组织中Integrinβ₁、FAK及凋亡相关蛋白的表达作,进而在恢复CHF大鼠的心功能过程中发挥其保护心肌组织的作用。