垫状卷柏化学成分研究

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垫状卷柏(Selaginella pulvinata ( hook et Grev ) Maxim.)为卷柏科卷柏属植物,在我国分布广泛。《中国药典》(2005版)收载品种为卷柏,民间常作为药用的卷柏属植物有20多个。现代药理学研究表明卷柏属植物不仅具有传统的消炎、解毒作用,而且具有抗炎、抗菌、抗病毒、增强免疫、抗肿瘤、降血糖、解痉等作用。为进一步研究垫状卷柏的药效物质基础,本课题对垫状卷柏的化学成分进行了较为系统的研究,垫状卷柏经70%乙醇提取后,浓缩得土黄色混悬液,离心后分为沉淀和溶液。沉淀部分经反复硅胶柱层析得到化合物I。溶液部分用D101型大孔树脂吸附后,分别用水,30%乙醇,70%乙醇,95%乙醇梯度洗脱,并浓缩成干膏,30%乙醇洗脱部分经反复硅胶柱层析,Sephadex LH-20凝胶柱层析,制备液相等手段分离得化合物II,III,IV和V。70%乙醇部分经反复硅胶柱层析,Sephadex LH-20凝胶柱层析得化合物VI和VII。采用UV, IR, 1H-NMR, 13C-NMR, 2D-NMR等多种波谱学方法鉴定结构分别为β-谷甾醇(I)﹑腺苷(II)﹑卷柏苷A(III)﹑丁香脂素-4, 4’-0-双-β-D-葡萄糖苷(IV)﹑咖啡酸(V)﹑穗花杉双黄酮(VI)﹑芹菜素(VII)。其中化合物II﹑III﹑IV﹑V为首次从垫状卷柏中分离得到。穗花杉双黄酮为垫状卷柏的主要活性成分之一,其含量的高低可以作为评价垫状卷柏内在质量的参考指标,可利用反相高效液相色谱法测定垫状卷柏中穗花杉双黄酮的含量,此方法灵敏、简便、准确。色谱条件:色谱柱:elite-ODS ( 250×4.6 mm,5μm);流动相:甲醇-0.05mol/L磷酸二氢钠溶液系统(梯度洗脱,0-20min, 50%-70%);柱温:40℃;流速:1.5ml/min;检测波长:330 nm。结果表明,在0.2-3.0μg范围内线性关系较好,相关系数r=0.9999,平均回收率为98.28%,RSD为1.93%。本论文对山东、辽宁、湖北、河北、吉林五个产地的垫状卷柏分别进行了考察,以期对垫状卷柏质量标准的建立提供参考。
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