β-半乳糖苷酶可以催化糖苷类化合物的合成，解决乳糖不耐受症以及作为酶类药物，对新生儿消化不良等方面具有重要的作用。本文采用生物信息学方法推测来自嗜热古细菌Sulfolobus Tokodaii strain 7基因组中的ORF0773为编码β-半乳糖苷酶的基因，构建了ST0773的大肠杆菌工程菌并对其可溶表达进行了初步的探索。首先培养古细菌并提取其基因组，设计引物并成功扩增出ST0773基因，将其连接到pET-28b质粒上，转入E.coli BL21（DE3）中进行表达。然后分别在20℃、30℃和37℃条件下诱导目的蛋白表达，经SDS-PAGE检测，上清中目的蛋白表达量比较低，大部分以沉淀的形式存在。鉴于该酶氨基酸序列中含有12%的稀有密码子，我们将其转入E.coli BL21（DE3）CondonPlus-RIL宿主细胞中，进行不同温度和不同IPTG浓度的诱导表达，但是大部分目的蛋白仍然是以沉淀的形式存在，从沉淀蛋白电泳图来看，表达量有明显的提高。为克服包涵体的形成，构建了三种重组表达载体pET-15b-0773、pET-32a-0773和pHUE-0773，转入E.coli BL21（DE3）CondonPlus-RIL中诱导表达，发现目的蛋白绝大部分仍然是以沉淀的形式存在。结果表明，β-半乳糖苷酶ST0773在大肠杆菌中主要以包涵体形式表达，硫氧还蛋白融合表达和泛素融合表达也不能改善包涵体的形成。