本文依托实验室自建的杂色鲍转录组数据库、网络NCBI和KEGG数据库,筛选出若干杂色鲍幼虫能量代谢相关的基因片段,并构建了杂色鲍幼虫能量代谢调控网络。通过设计RNA干扰实验和诱导实验,利用qPCR和原位杂交检测基因表达情况,主要研究结果如下:(1)以甲状腺激素信号通路和胰岛素/胰岛素样生长因子信号通路基因为核心,结合NCBI的核酸数据库、文献和网上的资料,经过序列拼接并使用Blast2Go软件对其转录组序列进行注释分析,最终获得具有明确功能注释的候选基因序列186个,将其分为细胞组分、生物学过程和分子功能共三类。进一步分析各基因表达量变化趋势,将106条表达量具有显著性差异基因的功能进行分析,归类为免疫或应激反应、蛋白质翻译过程、细胞新陈代谢、细胞周期、膜蛋白、转录调节、染色体组成、钙离子结合、神经系统和未知九类。(2)使用统计学软件SPSS对所有基因两两之间的表达量相关系数r进行计算,并将结果导入Cytoscape软件中,绘制杂色鲍幼虫能量代谢调控网络,这是对爆炸性增长的测序数据发掘利用的一次尝试。(3)RNA干扰实验和诱导实验结果显示甲状腺激素能正调控的信号通路有MAPK(ERK)、PI3K、HIF-1α、STAT1,涉及的代谢功能有糖酵解、糖原生成。而GSK的表达量在干扰实验时没有变化,在诱导实验中才有变化且变化趋势与甲状腺激素相反,这说明该通路与甲状腺激素之间存在负调控关系。通过对TRβ、ATP6基因的原位杂交实验探究这两个基因的时空表达情况。结果发现,TRβ基因主要定位于面盘幼体内脏团背部,牵缩肌的基部;ATP6在TRβ基因转录水平高的地方也有高转录现象,表明TRβ基因可能促进了ATP的合成,参与了能量分配。(4)胰岛素不仅能够提高能量代谢的水平还能限制能量代谢的速度。胰岛素对能量代谢的调控作用没有甲状腺激素那么显著。通过对MIRP、ATP6基因的原位杂交实验探究这两个基因的时空表达情况。结果我们发现,MIRP基因也定位于面盘幼体内脏团背侧部,牵缩肌的基部位置,与甲状腺激素定位非常相似。另外,当对胰岛素进行诱导后,在腹足、面盘等位置也有大量的胰岛素表达。胰岛素浓度过高或过低都会导致杂色鲍幼虫能量代谢机制出现问题,使幼虫死亡。