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目前,水体富营养化已成为世界性环境问题,国内外对氮污染的治理日益重视,而生物脱氮技术因其迅速安全倍受青睐。作为生物脱氮技术之一的好氧反硝化工艺与传统的缺氧反硝化相比在某些方面具有独特优势,成为研究的热点。污泥通过在好氧、硝酸盐系统中长期驯化,诱导了菌株硝酸盐还原酶的表达,有效的富集了好氧反硝化菌。本论文利用BTB培养基,简单高效地完成耐氧脱氮污泥中的好氧反硝化菌的初步筛选。从实验室两个不同的反应器A和B中共分离筛选得到20株BTB平板阳性菌,除1株为革兰氏阳性、球菌外,其余19株均为革兰氏阴性、杆菌。经测定好氧反硝化性能,表明12株对NO3--N去除率达到50%以上的好氧反硝化菌,其中9株对TIN去除率也能达到50%以上,不仅从生物学角度证实本实验室SBR反应器中实现了真正意义上的好氧反硝化,并为后续对好氧反硝化菌的研究提供依据。对NO3--N和TIN的4天去除率均大于50%的其中6株菌进行生理生化试验,其特性基本一致:具有氧化酶、接触酶,能够氧化乙醇,不能分解色氨酸,不发酵葡萄糖,不能水解淀粉,不能液化明胶。但利用不同碳源的生长情况有所不同:WXZ-4,7,13,19四株菌利用柠檬酸三钠生长情况最好,而WXZ-9,WXZ-15利用琥珀酸钠生长情况最好。通过PCR扩增、16S rDNA测序结合同源性分析,确定了各菌株之间的分类学地位,共成功鉴别十五株独立的菌株分属于Pseudomonas,Delftia,Bacillus, Herbaspirillum和Comamonas,并揭示各独立菌株与标准株之间的同源性程度。先后采用两种提DNA方法:沸水浴法和化学生物法,经两种提取DNA方法的比较,虽然沸水浴比较简单易行,但化学生物法成功率明显更高。采用沸水浴初级提取,再经化学生物法的方法组合提取可行,可以明显简化许多步骤。通过查阅已有文献发现,Pseudomonas,Bacillus和Comamonas是三类已有发现好氧反硝化菌的菌属,而Delftia和Herbaspirillum迄今尚未见报道具有好氧反硝化性能。本论文首次发现Delftia具有高效的好氧反硝化性能,应成为今后本研究室好氧反硝化研究的重点。