怀山药(Dioscorea opposita Thunb.)、怀地黄[Rehmannia glutinosa f.hueichingensis(Chan el Sehih)Hsiao]、怀菊花[Huaiqing chrysanthemum(Dendranthema morifolium)]和怀牛膝(Achyranthes bidentata Bl.)是我国著名的“四大怀药”,其独特的药效和滋补作用蜚声海内外。自我国加入WTO后,GAP认证成为农产品进出口的一个重要条件,四大怀药种源的离体培养、脱毒快繁和离体保存等工作是实现四大怀药GAP的基础和前提,因而对四大怀药试管苗遗传稳定性进行研究具有重要的意义。本文对超低温保存前后试管苗、脱毒及未脱毒试管苗以及常温下保存6年的试管苗进行了遗传稳定性研究。结果如下:　　 (1)不同基因型怀山药(B号山药、怀庆山药、铁棍山药和太谷山药)超低温保存后的再生植株和常温对照植株的同工酶(SOD、POD、PPO和AMY)酶谱没有差异；RAPD和ISSR分析也均没有条带的增减。即怀山药超低温保存后的再生植株在酶蛋白质水平和DNA分子水平均保持了稳定性。　　 (2)用筛选出3条引物对铁棍山药类原球茎再生植株和对照植株进行ISSR标记,在扩增出的13条带中没有发现差异条带,即铁棍山药经类原球茎途径形成的再生植株遗传稳定性没有发生改变。　　 (3)用筛选出的7条引物对怀地黄“85-5”的十个脱毒株系和一个未脱毒株系进行ISSR标记,在扩增出来的36条带中没有发现差异条带,怀地黄脱毒苗在DNA分子水平保持了稳定性。　　 (4)超低温保存后的小黄菊再生植株和常温对照植株经ISSR分析没有发现差异,在DNA分子水平保持了稳定性。　　 (5)对常温保存6年的怀牛膝6个株系的试管苗进行ISSR标记,筛选出来的3条引物共扩增出15条带,没有出现新的条带和缺失条带,即常温保存了6年的怀牛膝试管苗在DNA分子水平保持了遗传稳定性。　　 上述研究结果为四大怀药种质资源超低温保存后和优良品种脱毒快繁的应用奠定了理论基础。