英国红芸豆多糖提取、结构鉴定及对T2DM小鼠改善作用研究

来源 :黑龙江八一农垦大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:manking93
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英国红芸豆外观呈现紫红色是常见的豆科草本作物,为黑龙江省芸豆主要栽种品种之一,因其有色泽鲜艳、籽粒饱满和营养价值高等优点,深受消费者欢迎。其含有蛋白质、花色苷、多糖和皂苷等多种生物活性成分,可提高人体非特异性免疫,增强人体的抗病能力。多糖因其天然、活性功能多和毒副作用小等优点,在糖尿病防治领域被广泛关注。多糖是英国红芸豆中的一种有效活性成分,有限的研究表明英国红芸豆多糖具有一定的体外抗氧化活性。糖尿病是世界上最常见的慢性非传染性疾病之一,表现为高血糖、胰岛素抵抗等病症同时还伴随肝脏炎症等并发症,严重时危及生命。有研究指出非淀粉多糖可作为底物被肠道菌群降解为短链脂肪酸,改善肠道环境,使肠道菌群结构发生变化,进而改善二型糖尿病(T2DM)症状。但英国红芸豆多糖改善T2DM症状的研究未见报道。本文以英国红芸豆为原料,制备英国红芸豆多糖,通过理化性质测定、体外试验和体内试验,探究英国红芸豆多糖理化性质、对肥胖和肥胖引起的T2DM改善作用。为英国红芸豆精深加工提供参考,为研究改善T2DM的功能因子和开发新型抗T2DM功能性食品提供理论基础。主要研究结果如下:(1)以英国红芸豆为原料使用热水浸提法,利用单因素试验与响应面试验以英国红芸豆多糖得率为指标,提取温度、提取时间和料液比为考察条件优化提取工艺,并对其理化特性、功能特性和体外抗氧化活性进行研究。结果表明,最优提取条件为,提取温度92℃、提取时间1.5 h、料液比1:45(g/m L),得率为4.86%。化学组成表明英国红芸豆多糖主要由中性糖(33.02±0.21%),糖醛酸(24.79±0.35%)和蛋白质(3.84±0.32%)组成。理化结果表明英国红芸豆多糖是由Man、Glc N、Rha、Glc、Gal、Xyl、Ara和Fuc组成的一种结构松散无规则、具有良好热稳定性的杂多糖。功能特性分析表明英国红芸豆多糖具有较好的水合特性和持油性,分别为持水力(4.64±0.37 g/g)、水溶性指数(85.19±0.26%)和持油力(3.24±0.21 g/g)。体外抗氧化试验结果表明英国红芸豆多糖具有较好的DPPH自由基、·OH自由基清除能力,当多糖浓度为5 mg/m L时,分别为69.85%和53.61%且自由基的清除率与多糖溶液的浓度呈正比。(2)在英国红芸豆多糖的干预下T2DM小鼠的空腹血糖(FBG)、胰岛素(INS)和糖化血红蛋白(Hb A1c)水平均有下降,葡萄糖耐量上升;肠系膜脂肪堆积减少,总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)和低密度脂蛋白固醇(LDL-c)水平降低,高密度脂蛋白固醇(HDL-c)水平提高;谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、谷胱甘肽(GSH)和过氧化氢酶(CAT)水平上升,谷丙转氨酶(GPT)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)、肿瘤坏死因子(TNF-α)水平下降。(3)摄入英国红芸豆多糖可以增加T2DM小鼠结肠内容物短链脂肪酸(SCFAs)的产生,结肠内容物SCFAs中最主要的三种分别是乙酸,丙酸和丁酸。菌群分析表明,小鼠肠道菌群主要包括拟杆菌门、厚壁菌门、放线菌门、疣微菌门、变形菌门等,厚壁菌门和拟杆菌门为优势菌门;英国红芸豆多糖可以通过降低厚壁菌门/拟杆菌门比率,增加阿克曼菌属、普拉梭菌属、戈多尼菌属丰度,达到改善肠道微环境的效果。相关性分析表明肠道菌群与GSH、GSH-Px和CAT含量呈正相关,与FBG、INS和白细胞介素-1β(IL-1β)呈负相关。研究结果表明,英国红芸豆多糖最优提取工艺为,提取温度92℃、提取时间1.5 h、料液比1:45(g/m L),得率为4.86%,具有较好的体外抗氧化活性。摄入英国红芸豆多糖,增强胰岛素敏感性,改善T2DM特征指标;改善血脂指标与肥胖,缓解T2DM引起的肝脏炎症,保护脂代谢紊乱肝脏,改善血脂异常代谢;通过英国红芸豆多糖酵解产生的SCFAs改善肠道微环境并有益于提高小鼠的肠道健康状态,增加有益菌属丰度,调节肠道菌群的构成,从而维持肠道健康。以上结果表明英国红芸豆多糖可能通过增加由酵解产生的SCFAs改善肠道微环境并有利于提高小鼠的肠道健康状态进而改善胰岛素抵抗,调节T2DM特征指标。这些试验结果可以为英国红芸豆多糖在功能性食品领域的应用提供一定的理论依据。
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