麦红吸浆虫SmHSP23基因的克隆及其在滞育与温度胁迫下的表达

来源 :西北农林科技大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hn_hcg
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小热休克蛋白(Small heat shock proteins,sHSPs)不仅与环境胁迫而且与昆虫滞育密切相关。麦红吸浆虫Sitodiplosis mosellana(Géhin)属双翅目瘿蚊科,是一种典型的专性滞育昆虫,滞育过程中经历酷暑和严寒。为探究sHSPs在麦红吸浆虫滞育中的作用,本研究采用RACE技术克隆麦红吸浆虫SmHSP23的cDNA全长,并通过实时定量PCR(qPCR)技术对SmHSP23在麦红吸浆虫滞育及极端低温胁迫下的mRNA表达水平进行分析。主要结果如下:1.麦红吸浆虫SmHSP23基因(GenBank登录号为KT749988)cDNA全长1087 bp,开放阅读框为582 bp,编码193个氨基酸,相对分子量为21.98 kDa,理论等电点为5.67。SmHSP23氨基酸序列与摇蚊的一致性最高,为59%。2.SmHSP23在麦红吸浆虫滞育不同时期的表达量存在显著差异。滞育前较高,进入滞育显著降低,仅为滞育前的0.12倍;滞育期9月以前维持在较低水平,10月之后逐渐上升,翌年1月达到最高,为滞育前的3.43倍;滞育解除后表达水平再次下降。3.短期极端低温胁迫可进一步提高越冬滞育幼虫SmHSP23的表达,其中-5℃胁迫下表达水平最高,为未处理幼虫的6.20倍,显著高于其它处理;其次为-10℃处理,表达水平高于0℃、-15℃和未处理幼虫。4.低温处理时长显著影响SmHSP23的表达。-5℃下,30和60 min表达水平最高,显著高于0、15和120 min处理;-10℃下,60 min表达水平最高,其他处理时长与对照无显著差异。本研究结果有助于深入了解麦红吸浆虫滞育的分子调控机理,而且可为进一步探明其滞育过程中对逆境的耐受机制开拓思路。
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