【摘 要】
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Importin4（IPO4）属于核受体家族,在物质转运入核中发挥重要作用。然而对于IPO4转录调控的研究很少。本研究发现ETS转录因子ELK1和GABP可以结合IPO4启动子并调控其转录。我们鉴定了 IPO4启动子上一个具有启动子活性的最小区域,位于-108-+118。进一步的实验发现该区域上的GGAA序列对启动子活性具有决定性影响,该序列是ETS转录因子已知的结合序列。ETS转录因子家族的两个
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Importin4（IPO4）属于核受体家族,在物质转运入核中发挥重要作用。然而对于IPO4转录调控的研究很少。本研究发现ETS转录因子ELK1和GABP可以结合IPO4启动子并调控其转录。我们鉴定了 IPO4启动子上一个具有启动子活性的最小区域,位于-108-+118。进一步的实验发现该区域上的GGAA序列对启动子活性具有决定性影响,该序列是ETS转录因子已知的结合序列。ETS转录因子家族的两个成员ELK1和GABP可以分别抑制和激活IPO4转录。GABP可以激活启动子的活性约3倍,ELK1抑制启动子活性约70%,而这种活性依赖于ETS结合位点。我们还发现,逐渐提高GABP的量可以解除ELK1对IPO4的转录抑制;相反,逐渐提高ELK1的量可以解除GABP对IPO4的转录激活作用。我们得出结论,两者可以竞争调控IPO4转录。通过EMSA实验,我们证实ELK1和GABP可以分别结合于IPO4启动子上的GGAA序列,同时两者存在竞争关系。通过染色质免疫沉淀,我们进一步鉴定了 ELK1结合于IPO4启动子的GGAA序列。我们在蛋白水平上证明了 ELK1和GABP可以分别调控IPO4表达。在HeLa细胞中过表达ELK1下调IPO4的表达,相反,过表达GABP可以上调IPO4的表达。当敲低ELK1后,IPO4的表达上调。为了进一步研究IPO4的功能,我们在脂肪细胞3T3-L1中敲除IPO4,可以促进脂肪细胞分化,这说明IPO4参与了脂肪细胞分化。总之,我们发现ETS转录因子ELK1和GABP通过ETS结合位点调控IPO4基因表达。
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