论文部分内容阅读
目的:观察不同fimA型牙龈卟啉单胞菌(P.gingivalis)对人脐静脉内皮细胞(humanumbilical vein endothelial cells,HUVEC)产生内皮素-1(endothelin-1,ET-1)与一氧化氮(nitric oxide,NO)的可能的影响。
方法:标准条件下厌氧培养ⅠfimA型(ATCC33277)、ⅡfimA型(WCSP115)、ⅣfimA型(W83)牙龈卟啉单胞菌(P.gingivalis),并进行形态学及生化鉴定。体外培养HUVEC,待细胞单层融合后,分别加入三型P.gingivalis共同培养,分别于2h,8h,24h,48h时收集上清液,以ELISA法检测上清中ET-1的含量,硝酸还原酶法测定上清中NO的含量。各组均设阴性对照组(空白)及阳性对照组(E.coli-LPS)。
结果:1、HUVEC在Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ fimA型P.gingivalis刺激作用下均可产生ET-1与NO。ET-1与NO产生量存在时间依赖效应,在2h,8h,24h时随时间的延长而增加;48h时NO的分泌量显著下降,ET-1分泌升高。
2、在四个时间段内,Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ fimA型P.gingivalis刺激HUVEC释放的ET-1与NO的水平升高,与E.coli-LPS及阴性组比较,差异具有统计学意义(P<0.05);Ⅱ、ⅣfimA型P.gingivalis刺激HUVEC释放的ET-1与NO的水平高于Ecoli-LPS及ⅠfimA型P.gingivalis,其差异具有统计学意义(P<0.05)。
结论:HUVEC在Ⅰ、Ⅱ、ⅣfimA型P.gingivalis刺激作用下均可产生ET-1与NO,且NO分泌量随时间的延长具有先增高后降低的趋势。Ⅰ、Ⅱ、ⅣfimA型P.gingivalis对内皮细胞刺激作用具有差异性,可能与其本身毒力大小相关。