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作为表皮生长因子受体(EGFR)酪氨酸激酶抑制剂,抗癌药物厄洛替尼和吉非替尼已经在临床上广泛用于治疗癌症病人。厄洛替尼和尼吉非替尼主要用于治疗结肠癌,非小细胞肺癌和胰腺癌。厄洛替尼与吉非替尼是治疗癌症的代表性的EGFR-TKI,它们能够有效提高患者的综合生存率,但同时会引发一些药物的不良反应,其中皮肤和胃肠道的副作用最为严重。胃肠道的副作用所引发的肠炎常常妨碍化疗的顺利实施和药物剂量的提高,严重者会休克甚至危及生命。因此要降低药物的使用剂量就无法达到相应的使用效果。厄洛替尼和吉非替尼作为酪氨酸激酶抑制剂类抗肿瘤药物其所引发的肠炎机制尚不明确,本研究主要围绕厄洛替尼及吉非替尼所引发的肠炎和机理进行研究,考察了体内、体外厄洛替尼和吉非替尼对于肠上皮细胞的影响,探讨了其对肠上皮细胞的凋亡、炎症因子的分泌和通透性的影响,进一步确定其可能的作用机制是由于激活了细胞的内质网应激通路。本文的第一章主要从体内实验考察药物对于肠上皮细胞的作用。分别用厄洛替尼和吉非替尼灌胃55天后发现,小鼠的体重明显减轻,血清中IL-6的含量也显著增加,肠组织病理学检查也显示药物明显引起肠炎的发生,其中包括炎症细胞的浸润,小肠绒毛结构的改变等,TUNEL结果的显示小鼠肠内凋亡的上皮细胞的增加。免疫组化的结果显示,肠上皮细胞中CHOP的表达随着药物浓度的升高而加大,E-cadherin的表达随着药物浓度的增高而减少。提取小鼠肠组织测其炎症因子的mRNA水平,发现IL-6,IL-25, IL-17和SOCS3都随着药物的作用显著上调。第二章中从体外实验考察了两种EGFR酪氨酸激酶抑制剂类抗癌药物厄洛替尼和吉非替尼在体外对于肠上皮细胞的影响。流式结果显示厄洛替尼和吉非替尼剂量依赖性的引发了IEC-6细胞的凋亡；ranswell的结果显示细胞通透性增加,表明细胞间的紧密连接受到损伤。通过检测细胞间紧密相关蛋白的表达,发现E-cadherin和ZO-1显著下调。实时定量PCR的结果显示,厄落替尼对IEC-6细胞分泌炎症因子有影响,IL-6,IL-25和SOCS3十分显著上调。进而又在原代大鼠肠上皮细胞上考察药物的作用,E-cadherin显著下调,ZO-1下调,炎症因子显著上调,与细胞株IEC-6的结果一致。以上体外实验的结果表明,厄洛替尼和吉非替尼会引发肠上皮细胞的凋亡,并且对肠上皮细胞通透性的改变以及炎症因子的分泌都有影响。第三章中主要利用肠上皮细胞(IECs)探讨了EGR酪氨酸激酶抑制剂引发肠炎的机制。药物触发肠上皮细胞中E-cadherin的胞浆-胞膜迁移,导致细胞间紧密联结损伤、通透性增加,并且药物引起E-cadherin迁移并不是通过影响EGRF-E-cadherin、β-catenin-E-cadherin的结合实现的。进一步的结果表明,厄洛替尼能够引起细胞内质网应激,CHOP和ATF4剂量依赖性上调。内质网应激发生在E-cadherin迁移之前,我们继而利用siRNA干扰细胞中CHOP的表达,观察到药物触发的E-cadherin由胞浆转移至胞膜的迁移被抑制,炎症因子下调,细胞损伤改善。这说明厄洛替尼引发肠上皮细胞的损伤是由内质网应激介导的。本论文对EGFR酪氨酸激酶抑制剂所引发的肠炎做了研究,在此基础上对药物引发肠上皮细胞损伤的机制做了进一步探讨。明确内质网应激是药物引起肠上皮细胞凋亡、分泌炎症因子、增加细胞间通透性的重要机制。这些发现对于临床上更好的使用EGFR酪氨酸激酶抑制剂这类分子靶向药物具有指导意义。本文还发现了内质网应激的关键蛋白CHOP参与调控上皮细胞中E-cadherin的迁移,这对研究肠上皮细胞损伤的机制具有重要意义。