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一些有机磷化合物(organophosphorus compound,OP)能够引发一种迟发性的神经病症,称为有机磷引起的迟发性神经病(organophosphate-induced delayed neuropathy,OPIDN)。虽然OPIDN事件报道以来已经过了一个多世纪,但是其作用机理仍然不清楚,更没有有效的治疗方法。本研究旨在研究咪康唑对OPIDN的影响及作用机理。我们以研究OPIDN常用的成年鸡为研究对象,用有机磷化合物磷酸三邻甲苯酯(tri-ocresyl phosphate,TOCP)为诱导剂,从症状得分、组织病理变化和维持髓鞘相关的信号蛋白等多方面探索咪康唑对OPIDN的影响及相关机理。首先将成年鸡分为三组(对照组;TOCP组;TOCP+咪康唑组),对照组口服空胶囊,TOCP组和TOCP+咪康唑组给予TOCP(750 mg/kg,po)处理,TOCP+咪康唑组从TOCP染毒第7天开始直到第21天连续腹腔注射咪康唑(3.5 mg/kg/days)。观察TOCP单独处理组发现从第8天开始成年鸡出现轻微的共济失调,随着时间的推移毒性症状加重(从中度而明显的不协调到严重性、经常性的站立困难),到最后完全瘫痪,根据症状观察可以得出OPIDN模型诱导成功。与TOCP单独处理相比,TOCP处理后再给予咪康唑能够明显改善TOCP引起的体重降低和毒性症状;对脊髓运动神经元尼氏体检测发现,与对照组相比,TOCP单独处理组尼氏体降低约40%,与TOCP单独处理组相比,TOCP+咪康唑组恢复到接近对照水平;对坐骨神经髓鞘特异性蛋白S100β进行免疫荧光染色,与对照组相比,TOCP单独处理组引起坐骨神经S100β明显减少,与TOCP单独处理组相比,TOCP+咪康唑组恢复到接近对照水平;超薄切片观察脊髓和坐骨神经髓鞘的完整性发现,与对照组相比较,TOCP单独处理组坐骨神经髓鞘损伤明显,而咪康唑能够明显改善TOCP引起的这种损伤。为了进一步探索咪康唑如何改善OPIDN,已知ErbB3/Akt和JNK/c-Jun和p38对于维持髓鞘的稳定至关重要。因此,我们运用蛋白免疫印迹的方法检测坐骨神经和脊髓组织ErbB3/Akt、JNK/c-Jun和p38以及维持髓鞘稳定的结构蛋白P0和MBP的变化。结果表明,与对照组相比,单独给予TOCP处理引起脊髓和坐骨神经ErbB3/Akt信号通路激活,脊髓组织JNK激活而坐骨神经JNK抑制,并引起髓磷脂碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)的明显下降。咪康唑可以抑制TOCP引起的ErbB3/Akt信号通路激活,能够恢复TOCP引起的脊髓组织JNK激活和坐骨神经JNK抑制,并且能恢复MBP表达水平。我们以sNF96.2雪旺氏细胞为模型进一步探讨咪康唑缓解TOCP引起的迟发性神经毒性作用机理,实验分为四组:DMSO溶剂对照组;咪康唑单独处理组;TOCP单独处理组;TOCP+咪康唑组。用免疫印迹的方法检测各个处理组ErbB3/Akt信号通路以及MBP的变化,结果显示,与对照组相比,单独给予TOCP处理引起雪旺氏细胞ErbB3/Akt信号通路激活以及MBP表达量明显下降,TOCP与咪康唑共同处理可以抑制TOCP引起的ErbB3/Akt信号通路激活,且能够恢复MBP表达水平。综上所述,可以得出咪康唑显著改善了由TOCP引起的成年鸡脊髓和坐骨神经的毒性症状和组织病理损伤。咪康唑可能通过调控ErbB3/Akt信号通路和JNK表达量来改善OPIDN。