研究背景:银杏叶提取物即从银杏叶片中提取的一种重要的药用活性成分。它的活性成分主要包含黄酮类,萜类内酯,以及少量其他成分,比如:氨基酸和矿物质等。^[1]银杏叶提取物在临床上主要用心血管疾病的治疗,也用于化妆品中^[2]。它的药理作用包括清除自由基,抗氧化,抗PAF（血小板活化因子）,抗病毒等。冬季皮肤皲裂临床病是一种常见的疾病,发病率高,主要发作部位为手背、手指、足跟,表现为皮肤粗糙、开裂、出血和疼痛,易受细菌感染。多见于老年人和女性。由于经常接触化学或机械的物质,特别是在冬季天气寒冷的情况下,皮下汗腺分泌,皮肤干燥,导致皮肤增厚,皮肤失去弹性,所以当手、脚活动时容易干裂。凝胶贴膏（巴布剂）是将药物加入到以水溶性高分子材料为主要成分的基质之中,经混合、涂布、切割等工艺,得以制备。与其它剂型相比,凝胶膏剂具备以下优点:生物利用度高,避免肝脏的首过效应,给药次数少,载药量大,靶向性强,无刺激性,使用方便等。^[3]本研究的目的是以银杏叶提取物为模型药物,采用凝胶贴膏为载体,将其制成合适的经皮给药制剂,为临床提供用于治疗手足皲裂、冻伤的安全有效的新药物制剂。研究内容:1.运用了处方单因素考察和体外透皮吸收实验,对银杏叶提取物凝胶贴膏的处方进行优化。2.对银杏叶提取物凝胶贴膏的质量进行评价,同时对银杏总黄酮醇苷（包括槲皮素,山奈素和异鼠李素）的含量建立合适的测定方法。3.考察比较不同剂型的银杏叶提取物的体外透皮吸收效果。4.考察银杏叶提取物对于大鼠皮肤皲裂模型的疗效和对小鼠耳朵冻伤模型的初步疗效以及刺激性和急性毒性,为其在临床上治疗手足皲裂和冻伤提供理论基础和实验依据。方法:1.银杏叶提取物凝胶贴膏的处方优化对银杏叶提取物凝胶贴膏处方进行优化,主要包括凝胶贴膏粘度的调整和对透皮吸收促渗剂的挑选两方面。在凝胶贴膏粘度调整方面,主要改变酒石酸的含量,观察比较含有不同酒石酸含量的凝胶贴膏的持粘度。在对透皮促渗剂的选择上,采用改良式Franz扩散池实验,着重对3%氮酮,3%氮酮+3%冰片,3%氮酮+3%丙二醇和空白组（不含透皮促渗剂）四组透皮促渗剂促进凝胶贴膏中银杏总黄酮醇苷体外透皮效果进行比较考察。2.银杏叶提取物凝胶贴膏的含量测定采取高效液相色谱法建立银杏总黄酮醇苷（包括槲皮素,山奈素和异鼠李素）的含量测定方法,并参照药典要求对银杏叶提取物凝胶贴膏的含膏量,赋形性和黏附力进行检查。3.银杏叶提取物体外经皮渗透效果采用改良式Franz扩散池,以离体的小鼠皮肤为渗透膜,建立了银杏叶提取物凝胶贴膏经皮渗透实验分析方法,考察了其凝胶贴膏,乳膏剂和醇溶液的透皮情况。4.银杏叶提取物凝胶贴膏的药效学评价和安全性评价通过建立大鼠皮肤皲裂模型和小鼠耳朵冻伤模型,主要考察了银杏叶提取物凝胶贴膏对大鼠皮肤皲裂模型的治疗效果,以及对小鼠耳朵冻伤模型的初步疗效。同时考察了其对动物皮肤刺激性和急性毒性。结果:1.在凝胶贴膏粘度调整方面,发现100g凝胶贴膏基质中含有0.2004g酒石酸时粘度最佳。在对透皮促渗剂的选择上,含有氮酮+丙二醇的凝胶贴膏在经皮渗透方面明显优于含有氮酮的凝胶贴膏、含有氮酮+冰片的凝胶贴膏和不含透皮促渗剂的凝胶贴膏,其中3%氮酮+3%丙二醇可用作银杏叶提取物凝胶贴膏的促渗剂。2.通过方法学考察确定银杏总黄酮醇的测定方法专属型好,精密度高及回收率高,能准确用于银杏总黄酮醇苷含量的测定。3.通过方法学考察发现,银杏叶提取物凝胶贴膏经皮渗透实验分析方法精密度好、专属性好、回收率高,能准确测定渗透液中银杏总黄酮醇苷的含量。比较银杏叶提取物凝胶贴膏,银杏叶提取物乳膏和银杏叶提取物醇溶液的体外透皮吸收的状况,结果表明,银杏叶提取物凝胶贴膏的透皮效果好于其他两种剂型。4.初步药效学以及皮肤刺激性、急性毒性实验表明自制的银杏叶提取物凝胶贴膏对大鼠皮肤皲裂模型有较好的治疗效果,能缓解小鼠耳朵冻伤模型造成的肿胀和炎症。安全性好,无毒、无刺激。结论:本研究建立的研究和检测方法简便、可靠、准确,制得的银杏叶提取物凝胶贴膏制备工艺简便可行,质量稳定可控,可显著提高药物的体外透皮吸收的速率,增加药物在皮肤中的滞留量。药效学研究表明银杏叶提取物凝胶贴膏具有良好的抗手足皲裂的作用和对冻伤有初步的治疗效果;皮肤刺激性及急性毒性试验结果表明,银杏叶提取物凝胶贴膏无毒、无刺激、安全性好。