论文部分内容阅读
MicroRNAs在正常细胞的自我更新,分化和肿瘤发生发展中扮演着十分重要的角色。MircroRNA100(MiR100)在2002年首次被发现,其位于11号染色体的q24.1区域(内含子2号),与let7a-2共转录。MiR1OO在许多癌症中表现出抑制增殖的功能。我们已经证明在乳腺癌细胞系和正常的乳腺细胞系中含有具有干细胞特性的一小类细胞,其可以通过Aldefluor分析实验将更具有Aldehyde dehydrogenase(ALDH)酶活性的细胞分离出。通过对ALDH阳性(干细胞)和阴性乳腺癌细胞中的microRNAs分析发现,MiR1OO可能对干细胞发挥重要作用。我们发现MiR100在ALDH阴性细胞中比ALDH阳性细胞中显著低表达。利用一种四环素诱导的MiR100慢病毒过表达系统,我们发现过表达MiR100可以在乳腺癌细胞系和小鼠异种移植瘤模型中减少ALDH阳性细胞比例,并且可以抑制肿瘤的生长和转移。这其中的机制是由于MiR100直接下调了BMPR2和一系列干细胞相关的调控基因和染色体重构基因的表达,如SMARCA5,SMARCD1,BAZ2A,FGFR and IGFR。内源性抑制MiR1OO可以促进小鼠异种移植模型中肿瘤的发展。这些结果表明MiR1OO可以调控乳腺癌中的肿瘤干细胞的自我更新和肿瘤发展,其在生物学和临床上都具有十分重要的应用前景。后续的研究我们发现,N端豆蔻酰化酶NMT1是MiR1OO的下游靶标之一。豆蔻酰化是蛋白翻译时和翻译后的一种修饰,其在细胞内信号转导和肿瘤生成中扮演着十分重要的角色。近年来的证据表明,针对豆蔻酰化的治疗是一种有效清除癌症的新方法。然而,对其机制的研究尚不清楚。我们在研究中发现,shRNA介导的NMT1敲低在体外和体内模型中抑制乳腺肿瘤的起始,增殖和发展。我们发现细胞内活性氧可以负调NMT1的表达,反过来NMT1的敲低会进一步增强细胞内氧化应激反应,从而形成一种正反馈调节机制。进一步的研究发现,抑制NMT1会导致降解蛋白的聚集和内质网应激反应,后者可以和线粒体互相作用从而产生更多的活性氧。产生的氧化应激反应和内质网应激反应继而可以激活JNK通路,产生自噬等反应抑制了三阴性乳腺肿瘤的发展。这些研究为靶向NMT1治疗乳腺癌提供了理论依据。