花椒乙醇提取液中黄酮物质分离、鉴定及滋味研究

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本文以竹叶花椒果皮为原料,采用乙醇为提取溶剂、超声波辅助提取花椒果皮中的总黄酮,并对其进行分离纯化及鉴定,再使用电子舌对其进行滋味分析。同时还研究了不同干燥方式下花椒乙醇提取液的抗氧化能力,为黄酮物质的提取和利用提供理论支持。研究的主要内容及结论如下:(1)对比研究不同干燥方式下,各采收期之间的花椒乙醇提取液的抗氧化活性,结果表明:5月30日到7月18日,花椒提取液的抗氧化活性呈现先上升再下降的趋势,在7月4日时,对ABTS.~+、DPPH.、羟基自由基的清除率以及总还原力均达到最大值。两种干燥方式下花椒乙醇提取液的抗氧化活性和总还原力都很强,在体积浓度为250uL/mL时,自然晒干和恒温烘干的花椒乙醇提取液对ABTS.~+、DPPH.、羟基自由基的清除率分别为:77%、98%、63%和72%、96%、50%。(2)采用超声波辅助乙醇提取花椒果皮中的总黄酮,分别考察乙醇浓度、提取时间、料液比和提取温度对花椒果皮中总黄酮得率的影响,通过正交实验优化总黄酮提取工艺,同时,测定不同干燥方式下各采摘期的花椒黄酮含量,结果表明:四个单因素对花椒果皮中总黄酮得率的影响次序为:料液比>提取温度>提取时间>乙醇浓度。确定了花椒果皮总黄酮的最优提取组合为:料液比1:40g/mL;提取温度70℃;提取时间60min;乙醇浓度60%,在此组合条件下,花椒果皮中总黄酮得率为1.29%。不同干燥方式对花椒果皮中总黄酮得率的影响关系为:恒温烘干>自然晒干,并且5月30日到7月18日,随着采摘期的延长,花椒果皮中总黄酮含量出现先增加再降低的趋势,6月27日时,黄酮含量最高。(3)通过对竹叶花椒果皮中黄酮类物质进行硅胶柱层析、制备色谱纯化分离,从果皮中分离得到两种纯度为98%的黄酮类化合物单体,经红外、质谱和核磁鉴定结果为:化合物A:3,5,7-三羟基-8,4’-二甲氧基黄酮,该物质为首次在花椒中分离;化合物B:芦丁。(4)采用22种不同味道的常用中药的提取液为实验材料,利用电子舌的主成分分析和判别因子分析建立中药材滋味判别模型,并对所提黄酮类化合物的滋味进行判断,结果表明:电子舌对不同滋味的药材以及相同滋味的不同药材都可以很好的辨认区分开,识别指数均在93以上,主要的贡献因子为第一主成分和第二主成分,贡献率之和均在97%以上。选择酸味、苦味、咸味建立的判别模型,其交叉验证得分均高于75,正确率100%,模型准确可靠。对所提芦丁和3,5,7-三羟基-8,4’-二甲氧基黄酮进行苦味分析,证明芦丁具有苦味,其判别指数为85,3,5,7-三羟基-8,4’-二甲氧基黄酮不具有酸、苦、甜味。
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