赤雹根乙醇提取物活血化瘀作用的研究

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血瘀证临床以疼痛、肿块、瘀斑为主要特征。现代研究表明,血瘀证与血液循环、组织及细胞代谢异常,免疫功能障碍,血液高黏滞状态、血小板活化及其黏附聚集、血栓形成等多种病理生理改变有关,表明血瘀证与血液循环障碍关系密切。中医用中草药治疗血瘀证已有上千年的历史,在长期的医疗实践过程中,建立了自己独特的理论,并发现了许多具有活血化瘀作用且无明显毒副作用的中草药。国内近几十年来已运用能反映活血化瘀的药理效应指标进行植物药组分的筛选。获得阳性反应的组分至少涉及七类物质:黄酮、阿魏酸、硫化物、萜类、生物碱类、苷类、甾体类等。近期有文献中报道,三七总皂苷具有改善纤溶活性,降低纤维蛋白原,抑制血小板聚集,改善血液流变学异常,防止血栓形成等作用,从而改善微循环,延缓动脉粥样硬化的形成。赤雹根(The Root of Thladiantha Dubia, RTD)为葫芦科多年蔓生草本植物赤雹(Thladiantha Dubia Bunge,TDB)的干燥成熟块根,民间主要用于治疗跌打损伤、臃肿、关节肿痛、行经腹痛、气滞胸痛、乳房胀痛等,且无明显副作用,是一种具有重大研究和开发价值的中草药。前期研究表明,RTD中可能含有蛋白质、氨基酸、糖类、三萜皂苷类、有机酸、生物碱类等成分;RTD及赤雹根总皂苷(Total Saponins ofRTD, SRTD)有明显的镇痛和抗炎作用;SRTD对实验性佐剂型关节炎也具有显著的镇痛作用。实验证明,赤雹根乙醇提取物(Alcohol Extract ofThladiantha Dubia Root,AETR)可明显延长急性血瘀模型小鼠的出血时间和凝血时间。本研究结果表明:AETR对急性血瘀模型大鼠的血液流变学异常有明显的改善作用,可以延长其凝血时间、抑制血小板聚集;并可显著改善急性血瘀模型小鼠的耳廓微循环障碍。第一部分赤雹根乙醇提取物对血瘀模型大鼠活血化瘀作用的研究目的:观察AETR对急性血瘀模型大鼠血液流变学、凝血时间及血小板聚集率的影响,揭示并评价AETR的活血化瘀作用。方法:1、采用皮下注射盐酸肾上腺素(Adrenaline,Adr)加冰水浴的方法制作大鼠急性血瘀模型,以红细胞压积(Hematocrit,HCT)、血沉方程K值、血浆黏度、全血黏度为指标,评价AETR对血瘀模型大鼠血液流变学指标的影响。2、采用皮下注射Adr加冰水浴的方法制作大鼠急性血瘀模型,以凝血酶原时间(Prothrombin Time,PT)、凝血酶时间(Thrombin Time,TT)、活化部分凝血活酶时间(Activated Partial Thromboplastin Time,APTT)为指标,评价AETR对血瘀模型大鼠凝血时间的影响。3、采用皮下注射Adr加冰水浴的方法制作大鼠急性血瘀模型,以血小板聚集率为指标,评价AETR对血瘀模型大鼠血小板聚集率的影响。结果:1、AETR0.35g·kg-1、0.7g·kg-1和1.4g·kg-1剂量组大鼠的HCT分别是42.1±2.4、41.2±2.0、39.9±2.2(x±s,%),明显低于模型组45.2±1.7(x±s,%),差异具有显著统计学意义(P<0.01);血沉方程K值分别是3.51±0.40、3.35±0.32、3.16±0.33(x±s),明显低于模型组4.08±0.33(x±s),差异具有显著统计学意义(P<0.01);血浆黏度分别是1.20±0.07、1.19±0.06、1.18±0.03(x±s,mPa·s),明显低于模型组1.35±0.03(x±s,mPa·s),差异具有显著统计学意义(P<0.05或P<0.01);低切黏度分别是10.259±1.242、10.552±1.218、9.361±1.187(x±s,mPa·s),明显低于模型组12.032±1.376(x±s,mPa·s),差异具有显著统计学意义(P<0.05或P<0.01);中切黏度分别是5.220±0.611、5.191±0.578、4.915±0.730(x±s,mPa·s),明显低于模型组5.887±0.406(x±s,mPa·s),差异具有显著统计学意义(P<0.05或P<0.01);高切黏度分别是4.185±0.706、4.046±1.017、3.906±0.604(x±s,mPa·s),明显低于模型组4.748±0.662(x±s,mPa·s),差异具有显著统计学意义(P<0.05或P<0.01)。2、AETR0.35g·kg-1、0.7g·kg-1和1.4g·kg-1剂量组大鼠的PT分别是19.60±2.51、20.45±2.92、20.69±2.44(x±s,s),明显高于模型组15.45±4.04(x±s,s),差异具有显著统计学意义(P<0.05或P<0.01); TT分别是20.91±3.39、21.06±2.44、21.86±3.03(x±s,s),明显高于模型组16.86±1.48(x±s,s),差异具有显著统计学意义(P<0.05或P<0.01);APTT分别是17.38±2.01、18.80±1.60、19.66±2.44(x±s,s),明显高于模型组16.39±1.22(x±s,s),差异具有显著统计学意义(P<0.05或P<0.01)。3、 AETR0.7g·kg-1、1.4g·kg-1剂量组的血小板聚集率分别是43.72±6.99、40.01±9.38(x±s,%),明显低于模型组50.22±11.59(x±s,%),差异具有显著统计学意义(P<0.05)。结论:AETR可明显改善急性血瘀模型大鼠的血液流变学异常、延长其凝血时间及抑制血小板聚集,具有显著的活血化瘀作用。第二部分赤雹根乙醇提取物对血瘀模型小鼠耳廓微循环的影响目的:以小鼠耳廓微血管口径及毛细血管开放数量为观察对象,评价AETR对急性血瘀模型小鼠耳廓微循环的影响。方法:采用皮下注射Adr加冰水浴的方法制作小鼠急性血瘀模型,以耳廓微血管口径及毛细血管开放数量为指标,评价AETR对血瘀模型小鼠耳廓微循环的影响。结果:给药后,AETR0.35g·kg-1、0.7g·kg-1和1.4g·kg-1剂量组小鼠耳廓微动脉口径明显增大,20min时达作用高峰分别是44.38±4.17、45.63±3.20、46.25±3.53(x±s,μm),明显高于模型组38.13±2.58(x±s,μm),差异具有显著统计学意义(P<0.05或P<0.01);微静脉血管口径分别是78.13±3.72、81.88±2.58、83.75±2.32(x±s,μm),明显高于模型组66.88±2.58(x±s,μm),差异具有显著统计学意义(P<0.05或P<0.01);毛细血管开放数量分别是4.25±0.46、4.50±0.53、4.63±0.74(x±s,n),明显高于模型组3.63±0.52(x±s,n),差异具有显著统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:AETR具有明显改善血瘀模型小鼠耳廓微循环障碍的作用。
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