目的：通过诱导间充质干细胞(Mesenchymal Stem Cells,MSCs)向软骨细胞定向分化,观察补肾益精代表方左归丸含药血清对分化过程中MSCs增殖、软骨细胞标记基因表达Ⅱ型胶原和蛋白多糖表达的影响,为阐述“肾主骨”分子机制和从中药中寻找骨关节炎软骨保护剂奠定基础。方法：1,运用全骨髓法(贴壁筛选法)分离和培养大鼠MSCs并进行鉴定；2,制备左归丸含药血清,运用HPLC法初步分析左归丸含药血清其移行成分；3,CCK-8法检测左归丸含药血清对MSCs增殖的影响；4,诱导MSCs向软骨细胞分化,RT-PCR.免疫组织化学和Real-time PCR分析对诱导分化软骨细胞中Ⅱ型胶原和蛋白多糖表达影响。结果：1,全骨髓贴壁法分离MSCs,流式细胞仪检测发现,第三代MSCs高表达CD13和CD105,而不表达CD33,CD34,CD38,CD45,符合干细胞特征,21d左右可以获得较为纯化MSCs；2,HPLC法分析含药血清,能检测到稳定左归丸组方中君药熟地黄的主要成分5-羟甲基糠醛(5-hydroxymethyl-2-furfura,5-HMF)成分,提示获得可靠的干预药物。3,不同剂量组左归丸含药血清均能促进MSCs的增殖,其中以中剂量组增殖最为明显(p<0.05)；4,诱导第21天RT-PCR和免疫组织化学显示MSCs中表达Ⅱ型胶原mRNA和蛋白,其中左归丸含药血清组中Ⅱ型胶原mRNA表达明显高于单纯诱导组；Real-time PCR表明在21d,左归丸含药血清组中蛋白多糖mRNA相对表达定量分别约是7d和14表达量的16倍和3倍(p<0.05),并明显高于单纯诱导对照组(p<0.05)。结论：通过促进MSCs增殖、Ⅱ型胶原和蛋白多糖基因表达,可能是补肾中药软骨保护作用的分子基础之一。