模式识别受体介导的小鼠睾丸和附睾的天然抗病毒反应

来源 :北京协和医学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liongliong474
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背景与目的:病毒感染引起的睾丸炎和附睾炎,是破坏男性生育能力的重要因素。目前这两个生殖器官的天然抗病毒免疫机制尚不清楚,本论文主要研究模式识别受体介导的睾丸与附睾天然抗病毒机制,为预防和治疗相关疾病提供新线索。材料与方法:以小鼠为模型,用poly(I:C)和HSV60模拟病毒感染,利用实时定量RT-PCR检测基因的mRNA水平,Western blot测定基因的蛋白水平,免疫组化染色定位蛋白的分布,ELISA检测细胞因子和睾酮的分泌。利用TLR3基因敲除(TLR3-/-)小鼠和RNA干扰技术确证基因的功能。结果:睾丸Leydig细胞组成性表达病毒核酸受体MDA5、RIG-Ip204,其中MDA5也在圆形和长形精子中表达。MDA5和RIG-I可以被poly(I:C)激活,p204可以被HSV60激活,诱导睾丸抗病毒反应。附睾上皮细胞组成性表达多个病毒核酸受体,包括TLR3、RIG-I和DAI。p204与cGAS可以被HSV60诱导表达。TLR3和RIG-I可以被poly(I:C)激活,而DAI、p204 与 cGA S可以被HSV60激活,启动附睾天然抗病毒反应。在睾丸及附睾细胞中,poly(I:C)和 HSV60都能诱导Ⅰ型干扰素和抗病毒蛋白ISG15、OAS1和MX1的表达。poly(I:C)可以显著上调炎症因子TNF-α和MCP-1的表达,但HSV60并不影响TNF-a和MCP-1的表达。在TLR3-/-细胞中或用siRNA敲低RIG-I、DAI、p204或cGAS时,抗病毒反应明显减弱,说明这几个受体协同介导睾丸及附睾的天然抗病毒反应。结论:在睾丸中,MDA5/RIG-I启动抗RNA病毒的反应,而p204介导抗DNA病毒的天然免疫反应;在附睾中,TLR3与RIG-I介导抗RNA病毒的反应,DAI、p204和cGAS参与抗DNA病毒的反应。以上结果说明睾丸与附睾组织特异细胞具有完善的天然抗病毒能力。
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